Muundo wa mahali pa kazi kwa kuamua protini kwenye mkojo ni pamoja na vitu vifuatavyo:

1. Mirija ya majaribio ya kemikali, mirija ya majaribio ya agglutination.
2. Seti ya pipettes zilizohitimu.
3. Pipettes yenye mwisho mwembamba.
4. Taa za pombe au burner ya gesi.
5. Karatasi nyeusi.
6. Asidi ya glacial ya asetiki.
7. Asidi ya sulfosalicylic.
8. Asidi ya nitriki iliyojilimbikizia.
9. Maji yaliyosafishwa.

Njia za kuamua protini kwenye mkojo

Njia zote zinazotumika kwa ufafanuzi wa ubora protini katika mkojo ni msingi wa kuganda kwa protini. Kuganda kwa protini hudhihirishwa na viwango tofauti vya tope (kutoka opalescence hadi tope kali) au kupoteza flakes.

Uamuzi wa ubora wa protini kwenye mkojo unaweza kufanywa kwa njia zifuatazo:

1. kuchemsha na suluhisho la 10%. asidi asetiki;
2. majibu na suluhisho la 20% la asidi ya sulfosalicylic;
3. mmenyuko na ufumbuzi wa asidi ya nitriki 50% (mtihani wa Geller);
4. mmenyuko na mmumunyo wa 1% wa asidi ya nitriki katika mmumunyo uliojaa chumvi ya meza(mtihani wa Heller uliorekebishwa kulingana na Larionova).

Kabla ya uamuzi wa ubora wa protini kwenye mkojo, kazi ifuatayo ya maandalizi hufanywa:
1. Mkojo wa mawingu kuchujwa kupitia chujio cha karatasi. Ikiwa haiwezekani kupata filtrate wazi, chuja tena kupitia chujio sawa, au kuchanganya mkojo na kiasi kidogo cha udongo wa infusor au talc, baada ya hapo huchujwa.
2. Ikiwa mkojo ni wa alkali, hutiwa asidi na ufumbuzi wa asidi ya asetiki 10% kwa mmenyuko wa asidi kidogo chini ya udhibiti wa litmus au karatasi ya kiashiria cha ulimwengu wote.
3. Pamoja na maudhui ya chumvi kidogo (mkojo wa njano nyepesi au rangi ya njano yenye mvuto mdogo maalum) kwa kila mmoja
Ongeza matone machache ya suluhisho iliyojaa ya chumvi ya meza kwenye sampuli, kwani ukosefu wa chumvi husababisha kuganda kwa protini.
4. Kiwango cha turbidity kinazingatiwa kwa kutumia background nyeusi. Kadibodi nyeusi au karatasi nyeusi inayotumiwa katika upigaji picha hutumiwa kama msingi. Kuzingatia majibu dhidi ya asili nyeusi hukuruhusu kutambua kiwango kidogo cha uchafu.

Mirija ya majaribio yenye nambari huwekwa kwenye rack tofauti. Wanafanya mojawapo ya majibu yaliyoelezwa hapa chini.

1. Jaribu kwa kuchemsha na suluhisho la asidi asetiki 10%. Ili kufanya mtihani huu, unahitaji suluhisho la 10% la asidi ya asetiki, ambayo imeandaliwa kama ifuatavyo: 10 ml ya asidi ya glacial ya asetiki huwekwa kwenye silinda na kuongezwa na maji yaliyotengenezwa hadi alama ya 100 ml.

Mbinu ya kuamua protini. 10-12 ml ya mkojo uliochujwa wa mmenyuko wa asidi kidogo huwekwa kwenye tube ya mtihani wa kemikali. Kisha sehemu ya juu zilizopo za mtihani na mkojo huwashwa kwa uangalifu kwa chemsha na matone 8-10 ya suluhisho la 10% ya asidi ya asetiki huongezwa ndani yake. Bomba la majaribio lenye mkojo hutazamwa dhidi ya mandharinyuma nyeusi katika mwanga unaosambazwa. Katika uwepo wa protini katika mkojo, turbidity ya digrii tofauti inaonekana (kutoka opalescence hadi turbidity kali) au flakes huonekana. Inatumika kama udhibiti Sehemu ya chini mirija ya majaribio ambayo haijawashwa. Kipimo hiki hutambua kiasi cha protini kuanzia 0.015%o (%o - promille).

2. Mmenyuko na suluhisho la 20% la asidi ya sulfosalicylic. Suluhisho la 20% la asidi ya sulfosalicylic imeandaliwa kama ifuatavyo: 20 g ya asidi ya sulfosalicylic hupasuka katika 70-80 ml ya maji yaliyotengenezwa, kuhamishiwa kwenye silinda ya 100 ml na kuongezwa na maji yaliyotengenezwa kwa alama. Reagent iliyoandaliwa huhifadhiwa kwenye chombo kioo giza.

Mbinu ya kuamua protini. 2-3 ml ya mkojo uliochujwa wa mmenyuko dhaifu wa tindikali huwekwa kwenye mirija miwili ya mtihani ya kipenyo sawa, matone 3-4 ya suluhisho la 20% ya asidi ya sulfosalicylic huongezwa kwenye moja ya mirija ya majaribio, bomba lingine la mtihani hutumika kama suluhisho. kudhibiti. Iwapo kuna protini kwenye mirija ya majaribio yenye kitendanishi, tope huonekana au flakes za protini iliyoganda huanguka nje. Katika bomba la kudhibiti kioevu kinabaki wazi. Asidi ya sulfosalicylic, pamoja na protini ya seramu, huchochea albam (peptidi), ambayo ni bidhaa ya kuvunjika kwa protini. Ili kufafanua sababu ya mkojo wa mawingu, tube ya mtihani na mkojo ni joto. Uchafu unaosababishwa na uundaji wa protini za whey huongezeka, wakati uchafu unaosababishwa na kuwepo kwa albumosis hupotea. Jaribio hili lina unyeti sawa na uliopita.

3. Mwitikio na 50% ya ufumbuzi wa asidi ya nitriki (mtihani wa Geller). Suluhisho la asidi ya nitriki 50% imeandaliwa kama ifuatavyo: hadi 50 ml ya asidi ya nitriki mvuto maalum 1.2-1.4 kuongeza 50 ml ya maji distilled (1: 1 dilution).

Mbinu ya kuamua protini. 1 ml ya 50% ya asidi ya nitriki hutiwa kwenye tube nyembamba ya mtihani (matope ya agglutination). 1 ml ya mkojo wa mtihani uliochujwa huchukuliwa kwenye pipette yenye mwisho mwembamba uliopanuliwa, iliyowekwa kwenye reagent na tube ya mtihani huhamishiwa kwenye nafasi ya wima. Mbele ya protini kwenye interface ya vinywaji, a pete nyeupe. Wakati pete inaonekana na mali zake hutegemea kiasi cha protini: ikiwa kuna protini kidogo, pete haionekani mara moja, hivyo kuonekana kwake kunafuatiliwa kwa dakika 2.5-3. Kiwango cha chini cha protini kinachoamuliwa na njia hii ni 0.033°/oo. Kwa maudhui ya chini ya protini katika mkojo, pete haifanyiki. Matokeo ya majibu yanarekodiwa dhidi ya mandharinyuma nyeusi katika mwanga unaosambazwa.

4. Mmenyuko na suluhisho la 1% ya asidi ya nitriki katika suluhisho iliyojaa ya chumvi ya meza - mtihani wa Heller uliobadilishwa (kulingana na Larionova). Ili kufanya mtihani, tumia suluhisho la 1% la asidi ya nitriki iliyoandaliwa katika suluhisho iliyojaa ya chumvi ya meza (reagent ya Larionova). 35 g ya chumvi ya meza hupasuka katika 100 ml ya maji yaliyotengenezwa, suluhisho huchujwa, 99 ml ya suluhisho iliyojaa iliyoandaliwa ya chumvi ya meza huongezwa kwa 1 ml ya asidi ya nitriki iliyojilimbikizia na mvuto maalum wa 1.2-1.4.

Mbinu ya kuamua protini sawa na majibu ya 50% ya suluhisho la asidi ya nitriki (mtihani wa Geller), lakini badala ya 1 ml ya suluhisho la asidi ya nitriki 50%, 1 ml ya kitendanishi cha Larionova hutiwa ndani ya bomba la mtihani na 1 ml ya mkojo imewekwa juu. ni. Kuonekana kwa pete nyeupe kwenye interface ya kioevu inaonyesha kuwepo kwa protini katika mkojo unaojaribiwa. Jaribio la Larionova ni nyeti kama jaribio la Heller.

5. Mtihani wa rangi (kavu) kwa uamuzi wa ubora wa protini. Mtihani wa rangi (kavu) kwa uamuzi wa ubora wa protini kwenye mkojo unategemea athari ambayo protini ina kwenye rangi ya kiashiria kwenye suluhisho la bafa.

Mbinu ya kuamua protini. Kipande cha karatasi ya kiashiria kilichokusudiwa kuamua protini huingizwa kwenye mkojo muda mfupi. Jaribio linachukuliwa kuwa chanya ikiwa kipande cha karatasi kinageuka bluu-kijani.

Uamuzi wa kiasi cha protini kwenye mkojo

Uamuzi wa kiasi cha protini kwenye mkojo ni msingi wa ukweli kwamba wakati mkojo ulio na protini umewekwa na suluhisho la 50% ya asidi ya nitriki au reagent ya Larionova, pete nyeupe huundwa kwenye mpaka wa vinywaji viwili, na ikiwa pete nyeupe wazi inaonekana. kwa dakika 3, basi maudhui ya protini ni 0.033% o au 33 mg katika 1000 ml ya mkojo. Kuonekana kwa pete mapema zaidi ya dakika 3 kunaonyesha maudhui ya juu ya protini katika mkojo.
Wakati wa kuhesabu protini kwenye mkojo, sheria zifuatazo hufuatwa:

1. Uamuzi wa kiasi cha protini unafanywa tu katika sehemu hizo za mkojo ambapo iligunduliwa kwa ubora.
2. Uamuzi unafanywa na mkojo uliochujwa kwa uangalifu.
3. Mbinu ya kuweka mkojo wa mtihani na ufumbuzi wa 50% wa asidi ya nitriki au reagent ya Larionova kwa uwiano wa reagent kwa mkojo (1: 1) inafuatwa kwa ukali.
4. Wakati wa kuonekana kwa pete imedhamiriwa kwa kutumia stopwatch: katika hesabu ya mwisho ya kiasi cha protini, wakati wa kuweka mkojo kwenye asidi ya nitriki huzingatiwa, ambayo ni sekunde 15.
5. Dilution ya mkojo hufanyika kulingana na mali ya pete. Katika kesi hii, kila dilution inayofuata ya mkojo imeandaliwa kutoka kwa uliopita.
6. Pete zinatambuliwa kwenye mandharinyuma nyeusi.

Ya kawaida ni njia mbili za uamuzi wa kiasi cha protini katika mkojo: njia ya Roberts-Stolnikov-Brandberg na njia ya S. L. Ehrlich na A. Ya. Althauzen.

1. Mbinu ya Roberts-Stolnikov-Brandberg. Kulingana na njia hii, kiasi cha protini kwenye mkojo imedhamiriwa kwa kuipunguza hadi, wakati mkojo umewekwa na suluhisho la 50% la asidi ya nitriki au reagent ya Larion, pete inaonekana haswa katika dakika 3. Kiasi cha protini kinahesabiwa kwa kuzidisha 0.033% kwa kiwango cha dilution ya mkojo. Matokeo yaliyopatikana yanaonyesha kiasi cha protini katika miligramu kwa kila ml 1000 ya mkojo, yaani katika promille (%o).
2. Mbinu ya S. L. Ehrlich na A. Ya. Althauzen. Mfululizo wa zilizopo za agglutination huwekwa kwenye msimamo, ambayo 1 ml ya ufumbuzi wa 50% ya asidi ya nitriki au reagent ya Larionova hutiwa kwanza. Mkojo wa mtihani unachukuliwa na pipette tofauti, safi, kavu na mwisho mwembamba, uliotolewa na umewekwa kwenye reagent, baada ya hapo stopwatch imewashwa. Wakati wa kuonekana kwa pete unafuatiliwa kwa kuweka tube ya mtihani kwenye historia nyeusi. Wakati pete inaonekana, stopwatch imezimwa.

Wakati wa kuweka mkojo, kulingana na kiasi cha protini, pete ya kompakt, pana au kama thread inaweza kuonekana. Pete ndogo, pana inaonekana mara baada ya kuweka mkojo kwenye reagent. Pete inayofanana na uzi inaweza kuonekana mara moja, kabla ya dakika moja kupita, au ndani ya dakika moja hadi nne.

Ikiwa pete ya thread inaonekana ndani ya dakika moja hadi 4, hakuna haja ya kuondokana na mkojo!
Ili kuhesabu kiasi cha protini katika kesi hii, inatosha kutumia mpango wa meza uliopendekezwa na waandishi (Jedwali 1).

Mfano 1. Mkojo ulipowekwa kwenye kitendanishi, pete kama uzi iliundwa ndani ya dakika 2. Ikiwa pete ingeundwa kwa dakika 3, kiasi cha protini kingekuwa 0.033%.

Katika kesi hii, pete iliunda mapema. Marekebisho yanayofanana, kulingana na meza ya mpango, kwa muda wa dakika 2 ni sawa na 1 + 1/8. Hii ina maana kwamba protini katika sehemu fulani ya mkojo itakuwa mara 1+1/8 zaidi ya 0.033°/oo, yaani 0.033%o X(1+1/8) = 0.037°/oo.

Wakati pete-kama ya uzi inaonekana ndani ya dakika 1, i.e. baada ya sekunde 40-60, fanya dilution moja ya mkojo mara 1.5 (sehemu 2 ya mkojo + sehemu 1 ya maji), kisha uweke mkojo uliopunguzwa tena kwenye kitendanishi na urekodi kuonekana. ya pete. Wakati wa kuhesabu matokeo, inazingatiwa kuwa mkojo ulipunguzwa mara 1.5.

Mfano 2. Baada ya kuweka mkojo kupunguzwa mara 1.5, pete kama ya uzi ilionekana ndani ya dakika 2. Ikiwa pete ingeonekana kwa dakika 3, protini ingekuwa 0.033%. Marekebisho yanayolingana kulingana na jedwali la mpango kwa muda wa dakika 2 ni 1 + 1/8. Protini katika mkojo ina 0.033%oX1.5X(1+1/8) = 0.056%o.

Ikiwa pete ya thread inaonekana mara moja, mkojo hupunguzwa mara 2 (sehemu 1 ya mkojo + sehemu 1 ya maji). Mkojo uliopunguzwa huwekwa tena kwenye kitendanishi na kuonekana kwa pete hujulikana baada ya dakika 1.

Mfano 3. Wakati wa kuweka mkojo uliochanganywa mara 2 kwenye kitendanishi, pete kama uzi ilionekana baada ya dakika 1 sekunde 15. Kisha kiasi cha protini katika mkojo uliojaribiwa, kwa mlinganisho na mahesabu ya awali, itakuwa sawa na
0.033%оХ2Х(1+3/8) = 0.091%.
Ikiwa pete pana inaonekana, mkojo hupunguzwa mara 4 (sehemu 1 ya mkojo + sehemu 3 za maji).
Kwa safu inayofuata ya mkojo uliochanganywa, pete-kama uzi inaweza kuunda kabla au baada ya dakika moja. Katika hali kama hizi, kiasi cha protini kinahesabiwa kwa mlinganisho na mifano iliyopita, i.e. 0.033% o inazidishwa na kiwango cha dilution na marekebisho yanayolingana.

Mfano 1. Baada ya kuondokana na mkojo mara 4, pete ilionekana mara moja. Mkojo hupunguzwa mara 2. Baada ya kuweka mkojo, diluted mara 8 (4X2), pete-kama thread iliundwa ndani ya dakika 1.5. Katika kesi hii, kiasi cha protini ni 0.033%oX8X1.25 = 0.33%o, nk.
Wakati pete ya compact inaonekana, mkojo hupunguzwa mara 8 (sehemu 1 ya mkojo + sehemu 7 za maji). Mkojo ulioyeyushwa unapowekwa kwenye kitendanishi, pete fupi, pana au kama uzi inaweza kuunda.

Mfano 2. Wakati mkojo uliwekwa kwenye asidi ya nitriki, pete ya kompakt iliundwa mara moja. Mkojo hupunguzwa mara 8 (sehemu 1 ya mkojo + sehemu 7 za maji) na safu tena. Hii tena ilitoa pete ya kompakt. Kisha mkojo hupunguzwa mara nyingine 8 (ili kufanya hivyo, chukua sehemu 1 ya mkojo uliopunguzwa kwenye silinda au tube ya mtihani na kuongeza sehemu 7 za maji ndani yake). Baada ya safu nyingine ya mkojo uliochanganywa, pete kama ya uzi iliundwa mara moja. Mkojo hupunguzwa mara 2 (sehemu 1 ya mkojo + sehemu 1 ya maji). Baada ya safu nyingine ya mkojo uliochanganywa, pete-kama uzi huundwa ndani ya dakika 2. Kiasi cha protini katika sehemu fulani ya mkojo huhesabiwa kama ifuatavyo: 0.033.%oX8X8X2X(1+1/8) = 4.8%o.

Mbali na meza ya mpango, kuna meza yenye takwimu za protini zilizohesabiwa (Jedwali 2). Ikiwa mkojo haujapunguzwa, basi kiasi cha protini kinapatikana kwenye safu "Mkojo mzima, usio na maji." Unapopunguza mkojo kwa idadi kamili ya nyakati (8,4,2), tumia meza. 1. Unapopunguza mkojo mara 1.5, tumia meza. 2.

Mbinu ya kutumia jedwali kubainisha maudhui ya protini kwenye mkojo

Katika safu zinazofanana za meza, onyesha wakati wa kuonekana kwa pete na kiwango cha dilution ya mkojo.
Nambari iko kwenye hatua ya makutano ya usawa na mistari ya wima, iliyofanywa kutoka kwa viashiria hivi viwili, inaonyesha kiasi cha protini katika mkojo wa mtihani (% o).

Inawezekana kwamba kwa mtihani mzuri wa ubora wa protini, pete haifanyiki wakati imewekwa na ufumbuzi wa asidi ya nitriki 50%. Hii inamaanisha kuwa kuna protini chini ya 0.033% kwenye mkojo. Katika hali hiyo, kiasi cha protini katika fomu ya uchambuzi huteuliwa na neno "traces".

Ikiwa protini imehesabiwa, maudhui ya protini katika promille yanaonekana kwenye fomu ya uchambuzi wa mkojo, kwa mfano, "protini - 0.66%o."

Mbali na uamuzi wa kiasi cha protini katika sehemu tofauti ya mkojo, kiasi chake cha kila siku katika gramu kinahesabiwa. Kwa kusudi hili, mkojo wa kila siku hukusanywa, wingi wake hupimwa na maudhui ya protini katika promille imedhamiriwa. Kisha hesabu inafanywa. Kwa mfano, kiasi cha kila siku cha mkojo ni 1800 ml, protini ni 7 ° / oo. Hii ina maana kwamba kiasi cha kila siku cha mkojo kina protini: 1.8X7 = 12.6 g.

Uamuzi wa ubora na kiasi wa protini katika mkojo ni muhimu kwa kliniki.

Vipimo vya ubora wa kuamua protini kwenye mkojo
Zaidi ya athari 100 zimependekezwa kwa uamuzi wa ubora wa protini kwenye mkojo. Wengi wao hutegemea mvua ya protini kwa njia ya kimwili (inapokanzwa) au kemikali. Uwepo wa protini unathibitishwa na kuonekana kwa turbidity.

Sampuli za kavu za rangi pia ni za kupendeza.

Vipimo muhimu tu vya mazoezi ndivyo vitaelezewa hapa chini.

Jaribu na asidi ya sulfosalicylic. Kwa mililita kadhaa ya mkojo ongeza matone 2-4 ya suluhisho la 20% la asidi ya sulfosalicylic. Ikiwa majibu ni chanya, tope huonekana. Matokeo yake yameteuliwa na masharti: opalescence, chanya dhaifu, chanya au majibu chanya. Kipimo cha asidi ya sulfosalicylic ni moja ya vipimo nyeti zaidi vya kugundua protini kwenye mkojo. Inafichua hata yale yasiyo na maana upanuzi wa pathological protini kwenye mkojo. Shukrani kwa mbinu yake rahisi, mtihani huu umepata matumizi makubwa.

Jaribu na aseptol. Aseptol ni mbadala ya asidi ya sulfosalicylic. Inaweza kutayarishwa kutoka kwa nyenzo zinazopatikana katika maabara yoyote (phenol na asidi ya sulfuriki). Suluhisho la 20% la Aseptol hutumiwa kama kitendanishi. Mtihani unafanywa kama ifuatavyo: katika tube ya mtihani iliyo na 2-3 ml ya mkojo, ongeza 0.5-1 ml ya suluhisho la aseptol chini. Ikiwa pete nyeupe ya protini iliyoganda inaonekana kwenye kiolesura kati ya vimiminika viwili, sampuli ni chanya.

Mtihani wa Heller. Chini ya mililita chache za mkojo huongeza 1-2 ml ya asidi ya nitriki 30% (mvuto maalum 1.20). Ikiwa pete nyeupe inaonekana kwenye mpaka wa vimiminika vyote viwili, sampuli ni chanya. Mmenyuko huwa chanya ikiwa maudhui ya protini ni zaidi ya 3.3 mg%. Wakati mwingine pete nyeupe hupatikana ikiwa kuna kiasi kikubwa urati. Tofauti na pete ya protini, pete ya urate haionekani kwenye mpaka kati ya vinywaji vyote viwili, lakini juu kidogo. Larionova anapendekeza kutumia mmumunyo wa 1% wa asidi ya nitriki katika mmumunyo uliojaa wa chumvi ya meza kama kitendanishi badala ya 30% ya asidi ya nitriki; hii inatoa akiba kubwa asidi ya nitriki.

Jaribu na sulfidi ya chuma ya potasiamu na asidi asetiki. Mmenyuko huu hufanya iwezekanavyo kutofautisha protini za serum kutoka kwa nucleoalbumins.

Kiasi sawa cha mkojo hutiwa ndani ya mirija miwili ya majaribio. Matone machache ya suluhisho la 30% ya asidi ya asetiki huongezwa kwa mmoja wao. Ikiwa matokeo ni mawingu ikilinganishwa na tube ya kudhibiti, mkojo una nucleoalbumin. Ikiwa tope haionekani, yaliyomo kwenye mirija yote miwili ya mtihani huchanganywa na kugawanywa tena katika sehemu mbili. Ongeza matone machache (yakizidi sana yanaweza kugeuza mtihani chanya kuwa hasi) ya 10% ya ufumbuzi wa njano kwenye mojawapo ya mirija miwili ya majaribio. chumvi ya damu(sulfidi ya chuma ya potasiamu). Katika uwepo wa protini za whey, turbidity hupatikana.

Katika kesi ya mkojo uliojilimbikizia ulio na kiasi kikubwa cha asidi ya mkojo na urati, mtihani na sulfidi ya feri ya potasiamu na asidi ya asetiki inapaswa kufanywa baada ya dilution ya awali (mara 2-3) ya mkojo na maji. Vinginevyo, mawingu yanaweza kutokea kwa sababu ya asidi ya uric iliyokaa.

Hii ni muhimu hasa wakati wa kuchunguza mkojo watoto wachanga, yenye asidi nyingi ya mkojo na urati.

Kati ya vipimo vingine vya ubora wa protini kwenye mkojo, kulingana na uwekaji wa protini, zifuatazo zimetumika: mtihani wa kuchemsha, Esbach, Purdy, Roberts, Almen, Balloni, Buro, Claudius, Corso, Dome, Goodmann-Suzanne, Jollet, Exton, Kamlet, vipimo vya Kobuladze , Liliendahl-Petersen, Polacci, Pons, Spiegler, Tanre, Thiele, Brown, Tsushiya, nk.

Wakati wa kufanya vipimo vya ubora wa protini kwenye mkojo kulingana na mvua ya protini, yafuatayo lazima izingatiwe: kanuni za jumla, ukiukaji ambao husababisha makosa makubwa katika utafiti.

1. Mkojo unaopimwa lazima uwe na tindikali. Kwa mmenyuko wa alkali, mkojo hutiwa asidi kidogo na asidi ya asetiki. Kutoa sampuli yenye mkojo wa alkali katika hali ambapo asidi inatumiwa kama kitendanishi kunaweza kusababisha kutoweka kwa asidi na matokeo hasi katika majibu mazuri. Hii ni kweli hasa kwa mtihani wa asidi ya sulfosalicylic, kwani asidi huongezwa kwa kiasi kidogo sana na inaweza kupunguzwa kwa urahisi.

2. Mkojo unaopimwa uwe wazi.

3. Sampuli za kuamua protini kwenye mkojo zinapaswa kufanywa katika mirija miwili ya majaribio, ambayo moja hutumika kama udhibiti. Bila bomba la kudhibiti, unaweza usione tope kidogo wakati wa athari.

4. Kiasi cha asidi iliyoongezwa wakati wa kupima haipaswi kuwa kubwa sana. Kiasi kikubwa cha asidi kinaweza kusababisha uundaji wa acidalbumin mumunyifu na kugeuza sampuli nzuri kuwa hasi.

stahili umakini mwingi, shukrani kwa mbinu yake rahisi, sampuli za kavu za colorimetric. Vipimo hivi vinatumia athari ambayo protini ina kwenye rangi ya kiashiria kwenye suluhisho la bafa (kinachojulikana kama hitilafu ya protini ya viashiria). Kipande cha karatasi cha chujio kilicholowekwa kwenye bafa ya sitrati yenye tindikali na samawati ya bromophenol kama kiashirio hutumbukizwa kwa muda mfupi kwenye mkojo. Jaribio ni chanya ikiwa rangi ni bluu-kijani. Kwa kulinganisha ukubwa wa rangi na viwango vya karatasi za rangi, hitimisho la majaribio na la kiasi linaweza kutolewa. Karatasi ya kiashiria inauzwa katika reams na viwango vya rangi vinavyolingana, sawa na karatasi ya kiashiria cha ulimwengu wote.

Njia za kuamua kiasi cha protini kwenye mkojo
Mbinu nyingi zimependekezwa kwa uamuzi wa kiasi cha protini kwenye mkojo. Njia sahihi za kiasi cha kuamua protini katika nyenzo za kibaolojia hazijapatikana maombi pana wakati wa kuamua protini katika mkojo, kutokana na teknolojia ngumu na ya muda. Mbinu za volumetric, hasa njia ya Esbach, zimeenea. Wao ni rahisi sana, lakini, kwa bahati mbaya, sio sahihi sana. Njia za kikundi cha Brandberg-Stolnikov pia ni rahisi kwa kliniki, kutoa zaidi matokeo sahihi kuliko njia za ujazo, na mbinu rahisi. Ikiwa una photometer au nephelometer, njia za nephelometric pia zinafaa.

Mbinu ya Esbach. Ilipendekezwa na daktari wa Paris Esbach mwaka wa 1874. Mkojo na reagent hutiwa kwenye tube maalum ya mtihani (Esbach albuminometer). Bomba la majaribio limefungwa na kizuizi cha mpira, kilichochochewa vizuri (bila kutetereka!) nafasi ya wima hadi siku inayofuata. Mgawanyiko ambao safu ya sediment ya protini hufikia huhesabiwa. Nambari iliyopatikana inaonyesha maudhui ya protini. Ni muhimu sana kwa njia ya Esbach kwamba mkojo ni tindikali. Mkojo wa alkali unaweza kupunguza viambajengo vya tindikali vya kitendanishi na kuzuia kunyesha kwa protini.

Faida za njia: ni rahisi na rahisi katika mazoezi.

Hasara: njia sio sahihi, matokeo hupatikana kwa masaa 24 - 48.

Njia ya Brandberg-Stolnikov. Inategemea mtihani wa ubora wa Geller. Jaribio la Heller linaweza kutumika kwa uamuzi wa kiasi kwa sababu inatoa matokeo chanya na maudhui ya protini zaidi ya 3.3 mg%. Huu ndio mkusanyiko wa juu wa protini chini ambayo sampuli inakuwa hasi.

Marekebisho ya Ehrlich na Althausen. Wanasayansi wa Soviet S. L. Erlikh na A. Ya. Althauzen walirekebisha njia ya Brandberg-Stolnikov, wakionyesha uwezekano wa kurahisisha utafiti na kuokoa muda katika uzalishaji wake.

Urahisishaji wa kwanza unahusiana na wakati wa kuonekana kwa pete. Wakati halisi wa kuonekana kwake imedhamiriwa, bila lazima kuambatana na dakika ya 2 na 3.

Urahisishaji wa pili hufanya iwezekanavyo kuamua ni aina gani ya dilution inapaswa kufanywa. Waandishi walithibitisha kuwa dilution inayohitajika inaweza kuwa takriban kuamua na kuonekana kwa pete inayosababisha. Wanatofautisha thread-kama, pana
na pete ya kompakt.

Ya njia za nephelometric, inastahili kuzingatiwa Njia ya Kingsberry na Clark. Mimina 2.5 ml ya mkojo uliochujwa kwenye silinda ndogo iliyohitimu na ujaze na 3%. suluhisho la maji asidi ya sulfosalicylic hadi 10 ml. Koroga vizuri na baada ya dakika 5 piga picha kwenye cuvette ya sentimita 1 ukitumia kichujio cha manjano, ukitumia maji kama kioevu cha fidia. Kwa kipima picha cha Pulfrich, upotevu uliopatikana, unaozidishwa na 2.5, unatoa kiasi cha protini katika %o. Katika kesi wakati index ya kutoweka iko juu ya 1.0, mkojo hupunguzwa kwanza mara 2, mara 4 au hata zaidi.

Ili kuwa na wazo wazi la kiasi cha protini zilizotolewa kwenye mkojo, ni muhimu kuamua sio tu mkusanyiko wao katika sehemu tofauti ya mkojo, lakini pia kiasi chao cha kila siku. Ili kufanya hivyo, kukusanya mkojo wa mgonjwa kwa saa 24, kupima kiasi chake katika mililita na kuamua ukolezi wa protini katika sehemu ya mkojo wa kila siku katika g%. Kiasi cha protini kilichotolewa katika mkojo katika masaa 24 imedhamiriwa kulingana na kiasi cha kila siku cha mkojo katika gramu.

Umuhimu wa kliniki wa protini kwenye mkojo

Mkojo wa binadamu huwa na kawaida kiasi cha chini protini, ambayo haiwezi kuamua na vipimo vya kawaida vya ubora wa protini kwenye mkojo. Utoaji wa kiasi kikubwa cha protini, ambapo vipimo vya kawaida vya ubora wa protini kwenye mkojo huwa chanya, ni jambo lisilo la kawaida linaloitwa proteinuria. Proteinuria ni ya kisaikolojia tu kwa mtoto mchanga, katika siku 4-10 za kwanza baada ya kuzaliwa. Jina la kawaida la albuminuria sio sahihi, kwa sababu sio tu albamu hutolewa kwenye mkojo, lakini pia aina nyingine za protini (globulins, nk).

Proteinuria iligunduliwa kama dalili ya utambuzi mnamo 1770 na Cotugno.

Proteinuria ya figo inayofanya kazi zaidi kwa watoto ni kama ifuatavyo.

1. Proteinuria ya kisaikolojia ya mtoto mchanga. Hutokea kwa watoto wengi wachanga na haina maana mbaya. Inafafanuliwa na chujio dhaifu cha figo, uharibifu wakati wa kuzaliwa, au kupoteza maji katika siku za kwanza za maisha. Proteinuria ya kisaikolojia hupotea siku ya 4-10 baada ya kuzaliwa (baadaye kwa watoto wa mapema). Kiasi cha protini ni kidogo. Hii ni nucleoalbumin.

Albuminuria ya watoto wachanga ambayo inaendelea kwa muda mrefu inaweza kuwa dalili ya lues ya kuzaliwa.

2. Albuminuria ya kiharusi. Husababishwa na kuzidi kizingiti cha kuwashwa kwa kawaida kwa kichungi cha figo na mitambo, mafuta, kemikali, akili na hasira zingine - upotezaji wa maji kwa watoto wachanga (proteinuria ya upungufu wa maji mwilini), kuoga baridi, chakula chenye protini nyingi (alimentary proteinuria). palpation ya figo (palpatory albuminuria), kazi nyingi za kimwili, hofu, nk.

Albuminuria ya kiharusi inaonekana kwa urahisi zaidi kwa watoto katika umri mdogo kuliko kwa watoto wakubwa na watu wazima, tangu figo za watoto wachanga na mtoto mdogo huwashwa kwa urahisi zaidi. Ukosefu wa maji mwilini albuminuria (matatizo ya kulisha, udhaifu wa maji, toxicosis, kuhara, kutapika) mara nyingi huzingatiwa kwa watoto wachanga.

Albuminuria ya kiharusi ni mbaya. Wanatoweka mara moja baada ya sababu zinazosababisha kuondolewa. Wakati mwingine sediment ina leukocytes moja, casts na erythrocytes. Protini mara nyingi ni nucleoalbumin.

3. Proteinuria ya Orthostatic . Hali hii ni ya kawaida kwa shule ya mapema na umri wa shule. Inatokea kutokana na usumbufu wa vasomotor katika utoaji wa damu kwa figo. Kawaida ya albuminuria ya orthostatic (kwa hiyo jina lake) ni kwamba inaonekana tu wakati mtoto amesimama, wakati mgongo uko katika nafasi ya lordotic. Wakati amelala hupotea. Nucleoalbumin inatolewa. Katika hali ya shaka, unaweza kuamua majaribio ya orthostatic, ambayo yana yafuatayo: jioni, saa moja kabla ya kulala, mtoto hujisaidia. kibofu cha mkojo; Asubuhi, anapotoka kitandani, hutoa mkojo tena. Mkojo huu hauna protini. Kisha mtoto huwekwa kwa magoti yake kwa dakika 15-30 na fimbo nyuma ya mgongo wake, kati ya viwiko vilivyoinama vya mikono yote miwili. Msimamo wa lordotic huundwa, ambayo inaongoza kwa kutolewa kwa protini, bila mabadiliko katika sediment.

Kwa albuminuria ya orthostatic, 8-10 g ya protini inaweza kutolewa kwa siku.

Proteinuria ya figo ya kikaboni ina umuhimu muhimu zaidi wa kliniki kati ya proteinuria yote. Wao husababishwa na magonjwa ya figo ya kikaboni (nephritis, nephrosis, nephrosclerosis). Proteinuria ni mojawapo ya dalili muhimu na zinazojulikana zaidi za ugonjwa wa figo wa kikaboni.

1. Katika glomerulonephritis ya papo hapo na ya muda mrefu, protiniuria hutokea mara kwa mara. Kiasi cha protini ni wastani, na hakuna usawa kati ya kiwango cha proteinuria na ukali wa ugonjwa huo. Kinyume chake, nephritis ya muda mrefu na kali zaidi mara nyingi hutokea kwa protini kidogo kuliko nephritis ya papo hapo. Baada ya nephritis ya papo hapo, wakati mwingine kwa muda mrefu (miaka), kiasi kidogo cha protini hugunduliwa kwenye mkojo, bila umuhimu wa patholojia("mabaki albuminuria"). Hatupaswi kusahau kwamba "nephritis bila proteinuria" inaweza pia kutokea. Wakati mwingine protini hupatikana katika sehemu moja ya mkojo, lakini si kwa mwingine. Uwiano wa albumin na globulini katika nephritis ya papo hapo ni ya chini, na katika nephritis ya muda mrefu ni ya juu.

2. Kwa nephrosclerosis, kiasi cha protini katika mkojo ni kidogo sana; aina za ugonjwa bila protini katika mkojo hupatikana mara nyingi.

3. Katika magonjwa yote ya figo, nephrosis hutokea kwa protiniuria kali zaidi.

4. Katika hali ya kuambukiza na ya sumu, kinachojulikana kama febrile na sumu ya proteinuria hutokea. Hizi ni nephrosis ya papo hapo, ambayo kiasi cha protini ni ndogo. Kundi hili pia linajumuisha proteinuria wakati wa hali ya degedege (degedege), hyperfunction ya tezi ya tezi, homa ya manjano, intussusception, enterocolitis, nzito, anemia kali, nk Albuminuria hizi ni benign na hupita haraka (albuminuria ya muda mfupi).

5. Wakati damu inapungua kwenye figo, kinachojulikana kuwa albuminuria ya congestive hutokea, ambayo ni tabia ya wagonjwa wa moyo katika hatua ya decompensation. Pia hutokea kwa ascites na tumors ya tumbo.

Katika albuminuria yenye homa, yenye sumu na yenye msongamano, upenyezaji ulioongezeka wa kichujio cha figo hutamkwa haswa. Kwa mujibu wa waandishi wengine, wengi wa protini hizi hutokea bila uharibifu wa kikaboni kwa parenchyma ya figo.

Albuminuria ya nje ya matumbo kawaida husababishwa na uchafu wa protini (secretions, seli zilizooza), ambazo hutolewa na njia za mkojo zilizo na ugonjwa na sehemu za siri. Albuminuria ya nje ya urembo ni ya kawaida zaidi kwa sababu ya cystopyelitis (pyuria), mara chache kutokana na vulvovaginitis, mawe na uvimbe wa njia ya mkojo.

Katika kesi ya albuminuria ya extrarenal, sediment hupatikana idadi kubwa ya leukocytes na bakteria. Vipengele vya figo karibu hazipatikani. Kiasi cha protini ni kidogo. Mkojo uliochujwa au uliowekwa katikati kwa kawaida hauonekani kuwa na protini.

Kwa wale wanaopona kutoka kwa pyelitis, albuminuria hupotea baada ya bacteriuria na pyuria.

Inapaswa kusisitizwa kama jambo la tabia kwamba katika utoto wa mapema magonjwa ya figo ya kikaboni huonekana mara chache sana, kwa hivyo proteinuria ya kikaboni pia ni nadra. Kati ya hizi, kuna hasa homa na sumu. Tofauti na proteinuria ya kikaboni, albuminuria ya kiharusi ni ya kawaida sana kwa watoto katika umri mdogo.

Katika watoto wakubwa, proteinuria ya kikaboni mara nyingi hufanya kazi. Kwa ujumla, kwa umri, proteinuria ya kazi hutokea mara kwa mara, na proteinuria ya kikaboni mara nyingi zaidi.

Uchunguzi wa electrophoretic wa protini kwenye mkojo

Waandishi kadhaa hutumia njia ya electrophoretic kusoma protini kwenye mkojo (uroproteins). Kutoka kwa electropherograms zilizopatikana ni wazi kwamba wana sawa utungaji wa ubora wa juu pamoja na protini za plasma. Hii inaonyesha kwamba protini katika mkojo hutoka kwa protini za plasma.

Njia zote za kuamua protini katika mkojo zinategemea mgando wa protini chini ya ushawishi wa kemikali au mawakala wa joto. Ikiwa kuna protini katika mkojo, mawingu yanaonekana, kiwango cha ambayo inategemea kiasi cha protini.

A) sampuli za ubora uamuzi wa protini katika mkojo ni lazima.

1. Jaribu na asidi ya nitriki- ongeza kwa uangalifu kiasi sawa cha mkojo kwenye bomba la majaribio na 1-2 ml ya 50% ya suluhisho la asidi ya nitriki, ukijaribu kutikisa kioevu. Ikiwa protini iko kwenye mkojo, pete nyeupe inaonekana kwenye mpaka wa vinywaji viwili, vinavyoonekana vyema dhidi ya historia nyeusi.

2. Jaribu na asidi ya sulfasalicylic- 4-5 ml ya mkojo hutiwa ndani ya bomba la majaribio na matone 8-10 ya kitendanishi huongezwa. Ikiwa kuna protini katika mkojo, kulingana na kiasi chake, mawingu au flocculation inaweza kutokea.

3. Mtihani wa Express (sampuli kavu ya uchunguzi)- kipande cha karatasi ya kiashiria cha Albufan hutumbukizwa kwenye mkojo unaojaribiwa ili wakati huo huo kuloweka maeneo yote mawili ya viashiria (eneo la juu ni la kuamua pH, eneo la chini ni la kuamua protini). Baada ya sekunde 2-3, kamba huwekwa kwenye sahani nyeupe ya kioo. Tathmini inafanywa sekunde 60 baada ya kulowesha strip na mkojo, kwa kutumia kiwango cha rangi kilichochapishwa kwenye kesi ya penseli na vipande vya kiashiria.

B) sampuli za kiasi- uliofanywa katika sehemu hizo za mkojo ambapo protini iligunduliwa wakati wa uamuzi wake wa ubora; uamuzi unafanywa katika safu ya juu zaidi baada ya centrifugation

Njia ya Brandberg-Roberts-Stolnikov- 1-3 ml ya 50% ya ufumbuzi wa asidi ya nitriki hutiwa ndani ya bomba la mtihani na kiasi sawa cha mkojo huwekwa kwa uangalifu kwenye ukuta. Muda hurekodiwa kwenye saa ya kukatika. Ikiwa pete kwenye mpaka wa kioevu huunda mara moja au kabla ya dakika 2 baada ya kuweka, mkojo lazima upunguzwe na maji. Baada ya hayo, protini imedhamiriwa tena katika mkojo wa diluted. Dilution hufanyika mpaka pete nyeupe inaonekana kati ya dakika ya 2 na 3 wakati mkojo wa diluted hutumiwa kwa asidi ya nitriki. Kiasi cha protini kinatambuliwa kwa kuzidisha 0.033 ppm kwa kiwango cha dilution.

18. Mbinu ya kuchukua smears kwa flora, gonococci, trichomonas, uchunguzi wa cytological, KPI.

Mbinu ya kuchukua smears kwa mimea: nyenzo zinachukuliwa kutoka kwa mfereji wa kizazi na kutoka kwa urethra na brashi maalum chini ya udhibiti wa kuona. Sampuli inayotokana huwekwa mara moja kwenye slide ya kioo na ardhi.

Mbinu ya kuchukua smears kwa Trichomonas: kwanza, nyenzo hiyo inachukuliwa kwa kukwangua kutoka kwa membrane ya mucous ya urethra (baada ya massage ya awali kwa dakika 1 kwenye symphysis ya pubic) na fornix ya nyuma ya uke, kisha sehemu ya uke ya kizazi inafutwa na tasa. swab iliyotiwa na suluhisho la salini, kuziba kwa mucous huondolewa, na mfereji wa kizazi ingiza kwa uangalifu uchunguzi kwa kina cha si zaidi ya 1.0-1.5 cm na uchukue kukwarua kutoka kwa membrane ya mucous ya kizazi.

Mbinu ya kuchukua smears kwa gonococci: nyenzo huchukuliwa kutoka kwa urethra, tezi za Bartholin na ducts za paraurethral baada ya kuzifuta kwa pamba iliyotiwa na salini, kibano cha uke au uchunguzi maalum. Nyenzo huchukuliwa kutoka kwa rectum na kijiko kisicho. Katika kesi ya kisonono sugu na torpid, uchochezi hufanywa kabla ya utafiti ili kuongeza uwezekano wa kutambua pathojeni.

Huwezi kuchukua nyenzo na swab ya pamba wakati wa hedhi.

Mbinu ya kuchukua smears kwa uchunguzi wa cytological: smear inachukuliwa kutoka kwenye uso wa exocervix, uke na vulva kwa kutumia spatula, kutoka kwa endocervix kwa kutumia endo-brush. Nyenzo hiyo inatumika kwa safu nyembamba kwenye glasi iliyotiwa mafuta na kusindika utungaji maalum ili kuzuia seli kukauka. Maandalizi yanatiwa rangi kwa kutumia njia ya Papanicolaou (kinachojulikana kama PAP smear) na kuchunguzwa kwa darubini.

Kiashiria cha Karyopyknotic – asilimia seli za juu juu zilizo na viini vya pyknotic kwa seli zilizo na viini vya vesicular (zisizo za pyknotic). CPI mwanzoni mwa awamu ya follicular mzunguko wa hedhi 25-30%, wakati wa ovulation 60-70%, katika awamu ya luteal inapungua hadi 25%.

Algorithm ya kuamua protini kwenye mkojo kwa kutumia njia ya wazi.

Lengo: Utambuzi wa mapema wa gestosis ya marehemu.

Vifaa: chombo, chupa ya kuzaa, simama na zilizopo za mtihani, chupa yenye 30% ya sulfosalicylic au asidi asetiki, pipette, burner ya pombe.

1. Mweleze mama mjamzito kuhusu hitaji la utafiti huu.

2. Mwambie mama mjamzito kukusanya mkojo kwenye gudulia lisilozaa.

3. Mimina 4-5 ml kwenye tube ya mtihani. mtihani wa mkojo.

4. Jaribu na asidi ya sulfosalicylic:

Ongeza matone 6-10 ya asidi 30% ya sulfosalicylic kwenye bomba la mtihani na mkojo. Ikiwa kuna protini katika mkojo, sediment au wingu itaunda.

5. Jaribu na asidi asetiki:

6-10 ml ya mkojo hutiwa ndani ya bomba la mtihani na kuchemshwa kwenye burner ya pombe - mkojo unao na protini huwa mawingu. Ongeza matone machache ya suluhisho la asidi asetiki 3-5% kwenye mkojo wa mawingu. Ikiwa uwingu umetoweka, mtihani ni hasi.

Algorithm ya kuamua shughuli za kibiolojia ya uterasi kwa kuzaa. "Mtihani wa Oxytocin."

Lengo: kuamua utayari wa mwili kwa kuzaa.

Vifaa: 0.9% - 500.0 ufumbuzi wa salini, vitengo 5 vya oxytocin, sindano 10.0, pombe 70%, pamba ya pamba, kuangalia kwa mkono wa pili.

1. Mweleze mama mjamzito kuhusu hitaji la utafiti huu.

2. Mwombe mjamzito kuhakikisha anapumzika kikamilifu kihisia na kimwili kwa dakika 15 akiwa amelala chali. Hii ni muhimu ili kuzuia contractions iwezekanavyo ya uterasi kutokana na athari mambo mbalimbali.

3. Jaza sindano ya gramu 10 na 10 ml. suluhisho iliyoandaliwa kwa kiwango cha 0.01 IU ya oxytocin kwa 1 ml. suluhisho la kloridi ya sodiamu ya isotonic. Suluhisho limeandaliwa kama ifuatavyo:

Vitengo 5 (1 ml) vya oxytocin hupunguzwa katika 500 ml. ufumbuzi wa kloridi ya sodiamu isotonic (5 ID: 500.0 = 0.01 UNIT: 1 ml). Kutoka kwenye chupa, tumia sindano ya gramu 10 kuteka 10.0 ya suluhisho la matokeo ya mtihani.

4. Kufanya venipuncture na, kuhakikisha kwamba hakuwa na kusababisha contractions uterine, kuendelea utawala wa mishipa suluhisho la oxytocin.

5. Amua wakati wa kuanza kusimamia suluhisho.

6. "Jerky", 1 ml. kwa muda wa dakika 1, ingiza suluhisho, lakini si zaidi ya 5 ml. Kuacha utawala wa suluhisho wakati contractions ya uterasi hutokea.

7. Kipimo kinachukuliwa kuwa chanya ikiwa mikazo ya uterasi imesajiliwa ndani ya dakika 3 za kwanza tangu kuanza kwa sindano na leba hutokea ndani ya saa 24-48 zinazofuata. Mkazo wa uterasi unaoonekana baada ya dakika 4 baada ya kuingizwa huchukuliwa kuwa mtihani hasi - leba itatokea baada ya siku 3 hadi 8.

8. Rekodi matokeo katika nyaraka za msingi.

5.4. Algorithm ya kutathmini "ukomavu" wa kizazi.

Lengo: kuamua utayari wa kizazi kwa kuzaa.

Vifaa: dawa ya kuua vijidudu, matambara, glavu za kuzaa, meza.

1. Eleza kwa mwanamke mjamzito haja ya utaratibu huu.

2. Kutibu mwenyekiti na kitambaa kilichowekwa kwenye suluhisho la hypochlorite ya kalsiamu ya 0.5%.

3. Weka diaper safi kwenye kiti.

4. Weka mwanamke mjamzito kwenye kiti cha uzazi.

5. Tibu sehemu za siri za nje kwa kutumia moja ya suluhisho la kuua viini.

6. Vaa glavu za kuzaa.

7. Kwa mkono wako wa kushoto, sambaza labia kubwa kwa kidole chako cha kwanza na cha pili, na vidole 2-3. mkono wa kulia ingiza kwenye uke.

Ni moja ya muhimu zaidi na ishara za kudumu magonjwa ya figo na njia ya mkojo. Uamuzi wa ukolezi wa protini katika mkojo ni lazima na kipengele muhimu vipimo vya mkojo. Utambuzi na tathmini ya kiasi cha proteinuria ni muhimu sio tu katika utambuzi wa magonjwa mengi ya msingi na ya sekondari ya figo; tathmini ya mabadiliko katika ukali wa proteinuria kwa muda hutoa habari juu ya kozi hiyo. mchakato wa patholojia, kuhusu ufanisi wa matibabu. Utambuzi wa protini kwenye mkojo, hata kwa kiasi kidogo, unapaswa kukuarifu ugonjwa unaowezekana figo au njia ya mkojo na inahitaji uchambuzi wa kurudia. Ya kumbuka hasa ni kutokuwa na maana ya kuchunguza mkojo na, hasa, kuamua protini ya mkojo bila kufuata sheria zote za mkusanyiko wake.

Njia zote za kuamua protini kwenye mkojo zinaweza kugawanywa katika:

• Ubora wa juu,
• Nusu kiasi,
• Kiasi.

Mbinu za ubora

Wote vipimo vya ubora wa protini kwenye mkojo kwa msingi wa uwezo wa protini kujitenga chini ya ushawishi wa mambo anuwai ya mwili na kemikali. Ikiwa protini iko kwenye sampuli ya mkojo inayojaribiwa, aidha uchafu au mashapo yanayotiririka huonekana.

Masharti ya kuamua protini kwenye mkojo kulingana na mmenyuko wa kuganda:

1. Mkojo unapaswa kuwa tindikali. Mkojo wa alkali hutiwa asidi na matone machache (2 - 3) ya asidi asetiki (5 - 10%).
2. Mkojo unapaswa kuwa wazi. Unyevu huondolewa kupitia kichujio cha karatasi. Ikiwa uchafu haupotee, ongeza talc au magnesia ya kuteketezwa (kuhusu kijiko 1 kwa 100 ml ya mkojo), tikisa na chujio.
3. Mtihani wa ubora unapaswa kufanywa katika zilizopo mbili za mtihani, moja yao ni ya kudhibiti.
4. Unapaswa kutafuta ukungu kwenye mandharinyuma nyeusi kwenye mwanga unaopitishwa.

KWA mbinu za ubora Uamuzi wa protini kwenye mkojo ni pamoja na:

• mtihani wa kuchemsha, na wengine.

Kama tafiti nyingi zinavyoonyesha, hakuna hata mmoja idadi kubwa mbinu zinazojulikana Uamuzi wa ubora wa protini katika mkojo hauruhusu kupata matokeo ya kuaminika na ya kuzaliana. Pamoja na hayo, katika DDL nyingi nchini Urusi njia hizi hutumiwa sana kama uchunguzi - kwenye mkojo na athari chanya ya ubora, uamuzi wa upimaji wa protini unafanywa baadaye. Ya athari za ubora, mtihani wa Heller na mtihani wa asidi ya sulfosalicylic hutumiwa mara nyingi, lakini mtihani na asidi ya sulfosalicylic kwa ujumla huchukuliwa kuwa yanafaa zaidi kwa kutambua protiniuria ya pathological. Mtihani wa kuchemsha kwa sasa hautumiwi kwa sababu ya nguvu ya kazi na muda.

Njia za nusu-kiasi

KWA njia za nusu kiasi kuhusiana:

• uamuzi wa protini katika mkojo kwa kutumia vipande vya uchunguzi wa uchunguzi.

Njia ya Brandberg-Roberts-Stolnikov inategemea mtihani wa pete ya Heller, kwa hivyo kwa njia hii makosa sawa yanazingatiwa na mtihani wa Heller.

Hivi sasa, vipande vya uchunguzi vinazidi kutumiwa kuamua protini katika mkojo. Kwa uamuzi wa nusu kiasi wa protini kwenye mkojo kwenye mstari, rangi ya bromophenol ya bluu katika bafa ya sitrati hutumiwa mara nyingi kama kiashirio. Maudhui ya protini katika mkojo huhukumiwa na ukubwa wa rangi ya bluu-kijani ambayo inakua baada ya kuwasiliana na eneo la majibu na mkojo. Matokeo yake ni tathmini ya kuibua au kutumia uchambuzi wa mkojo. Licha ya umaarufu mkubwa na faida dhahiri njia za kemia kavu (unyenyekevu, kasi ya uchambuzi), njia hizi za uchambuzi wa mkojo kwa ujumla na uamuzi wa protini hasa sio bila vikwazo vikubwa. Mmoja wao, na kusababisha kupotosha kwa taarifa za uchunguzi, ni unyeti mkubwa wa kiashiria cha bluu cha bromophenol kwa albumin ikilinganishwa na protini nyingine. Katika suala hili, vipande vya mtihani hubadilishwa hasa ili kugundua protini ya glomerular iliyochaguliwa, wakati karibu protini zote za mkojo ni albumin. Pamoja na maendeleo ya mabadiliko na mpito wa protini ya glomerular iliyochaguliwa hadi isiyo ya kuchagua (kuonekana kwa globulins kwenye mkojo), matokeo ya uamuzi wa protini yanageuka kuwa ya kupunguzwa ikilinganishwa na maadili ya kweli. Ukweli huu haufanyi iwezekanavyo kutumia njia hii kwa kuamua protini katika mkojo ili kutathmini hali ya figo (kichujio cha glomerular) kwa muda. Kwa proteinuria ya tubular, matokeo ya uamuzi wa protini pia hupunguzwa. Upimaji wa protini kwa kutumia vipande vya uchunguzi sio kiashiria cha kuaminika viwango vya chini proteinuria (vipande vingi vya uchunguzi vinavyozalishwa hivi sasa havina uwezo wa kukamata protini kwenye mkojo kwenye mkusanyiko wa chini ya 0.15 g/l). Matokeo hasi Uamuzi wa protini kwenye vipande haujumuishi uwepo wa globulini, hemoglobin, uromucoid, protini ya Bence-Jones na paraproteini nyingine kwenye mkojo.

Slime flakes na maudhui ya juu glycoproteins (kwa mfano, na michakato ya uchochezi V njia ya mkojo, pyuria, bacteriuria) inaweza kukaa kwenye eneo la kiashiria cha ukanda na kusababisha matokeo chanya ya uwongo. Matokeo chanya ya uwongo yanaweza pia kuwa kwa sababu ya viwango vya juu vya urea. Taa mbaya na maono ya rangi yaliyoharibika yanaweza kusababisha matokeo yasiyofaa.

Katika suala hili, matumizi ya vipande vya uchunguzi inapaswa kuwa mdogo kwa taratibu za uchunguzi, na matokeo yaliyopatikana kwa msaada wao yanapaswa kuchukuliwa kuwa dalili tu.

Mbinu za kiasi

Sahihi uamuzi wa kiasi cha protini katika mkojo katika baadhi ya matukio inageuka si kazi rahisi. Ugumu wa kuisuluhisha imedhamiriwa na idadi ya mambo yafuatayo:

• maudhui ya chini protini kwenye mkojo mtu mwenye afya njema, mara nyingi kwenye kizingiti cha unyeti wa njia zinazojulikana zaidi;
• uwepo katika mkojo wa misombo mingi ambayo inaweza kuingilia kati na mwendo wa athari za kemikali;
• mabadiliko makubwa katika maudhui na muundo wa protini za mkojo wakati magonjwa mbalimbali, na kuifanya kuwa vigumu kuchagua nyenzo za kutosha za urekebishaji.

Katika maabara ya kliniki, mbinu zinazoitwa "kawaida" za kuamua protini katika mkojo hutumiwa hasa, lakini si mara zote hutoa matokeo ya kuridhisha.

Kwa mtazamo wa mchambuzi wa maabara, njia iliyokusudiwa kuamua kiasi cha protini kwenye mkojo lazima ikidhi mahitaji yafuatayo:

• kuwa na uhusiano wa mstari kati ya unyonyaji wa matokeo mmenyuko wa kemikali maudhui changamano na protini katika sampuli katika viwango mbalimbali, ambayo itaepuka shughuli za ziada wakati wa kuandaa sampuli kwa ajili ya utafiti;
• inapaswa kuwa rahisi, bila kuhitaji sifa za juu za mtendaji, na kufanywa na idadi ndogo ya shughuli;
• kuwa na unyeti mkubwa, kuaminika kwa uchambuzi wakati unatumiwa juzuu ndogo nyenzo zinazosomwa;
• kuwa sugu kwa mambo anuwai (kubadilika kwa muundo wa sampuli, uwepo wa dawa, nk);
• kuwa na gharama inayokubalika;
• kubadilika kwa urahisi kwa vichanganuzi otomatiki;
• matokeo ya uamuzi haipaswi kutegemea muundo wa protini wa sampuli ya mkojo unaojaribiwa.

Hakuna njia yoyote inayojulikana kwa sasa ya kuamua kiasi cha protini kwenye mkojo inayoweza kudai kuwa "kiwango cha dhahabu".

Mbinu za kiasi za kuamua protini kwenye mkojo zinaweza kugawanywa katika turbidimetric na colorimetric.

Mbinu za turbidimetric

Mbinu za turbidimetric ni pamoja na:

• uamuzi wa protini na asidi ya sulfosalicylic (SSA),
• uamuzi wa protini na asidi ya trichloroacetic (TCA),
• uamuzi wa protini na kloridi ya benzethonium.

Mbinu za turbidimetric zinatokana na kupungua kwa umumunyifu wa protini za mkojo kutokana na kuundwa kwa kusimamishwa kwa chembe zilizosimamishwa chini ya ushawishi wa mawakala wa mvua. Maudhui ya protini katika sampuli ya jaribio yanatathminiwa ama kwa ukubwa wa mtawanyiko wa mwanga, unaoamuliwa na idadi ya chembe zinazotawanya mwanga (njia ya nephelometric ya uchanganuzi), au kwa kupunguzwa kwa mtiririko wa mwanga kwa kusimamishwa (njia ya turbidimetric ya uchambuzi). )

Kiasi cha kutawanya kwa mwanga katika njia za unyeshaji kwa kugundua protini kwenye mkojo hutegemea mambo mengi: kiwango cha mchanganyiko wa vitendanishi, joto la mchanganyiko wa mmenyuko, thamani ya pH ya kati, uwepo wa misombo ya kigeni, na njia za picha. Kuzingatia kwa uangalifu hali ya athari itasababisha kuundwa kwa kusimamishwa imara na ukubwa wa chembe mara kwa mara na matokeo ya kuzaliana kiasi.

Baadhi dawa huathiri matokeo ya mbinu za turbidimetric za kuamua protini katika mkojo, na kusababisha kile kinachoitwa "chanya cha uwongo" au "matokeo mabaya ya uwongo". Hizi ni pamoja na baadhi ya antibiotics (benzylpenicillin, cloxacillin, nk), vitu vyenye iodini ya radiocontrast, dawa za sulfonamide.

Mbinu za turbidimetric ni ngumu kusanifisha na mara nyingi husababisha matokeo yenye makosa, lakini licha ya hii, kwa sasa zinatumika sana katika maabara kutokana na gharama ndogo na upatikanaji wa vitendanishi. Njia inayotumiwa sana nchini Urusi kwa uamuzi wa protini ni asidi ya sulfosalicylic.

Mbinu za rangi

Nyeti zaidi na sahihi ni mbinu za rangi za kuamua jumla ya protini ya mkojo, kulingana na athari maalum ya rangi ya protini.

Hizi ni pamoja na:

1. mmenyuko wa biuret,
2. Mbinu ya chini,
3. njia kulingana na uwezo wa dyes mbalimbali kuunda tata na protini:
   • Ponceau S,
   • Coomassie Brilliant Blue
   • pyrogallol nyekundu.

Kwa mtazamo wa mwigizaji, kazi ya kila siku Katika maabara yenye mtiririko mkubwa wa utafiti, njia ya biuret haifai kutokana na idadi kubwa ya shughuli. Wakati huo huo, njia hiyo ina sifa ya kuegemea juu ya uchambuzi, inaruhusu uamuzi wa protini katika viwango vingi na kugundua albin, globulins na paraproteins kwa unyeti kulinganishwa, kama matokeo ya ambayo njia ya biuret inazingatiwa kama dawa. rejea na inapendekezwa kwa kulinganisha mbinu zingine za uchanganuzi za kugundua protini kwenye mkojo. Njia ya biuret ya kuamua protini katika mkojo inapendekezwa kufanywa katika maabara zinazohudumia idara za nephrology, na hutumiwa katika hali ambapo matokeo ya uamuzi kwa kutumia mbinu nyingine ni ya shaka, na pia kuamua kiasi cha kupoteza protini kila siku kwa wagonjwa wa nephrology.

Mbinu ya Lowry, ambayo ni nyeti zaidi kuliko njia ya biuret, inachanganya mmenyuko wa biureti na mmenyuko wa Folini kwa amino asidi tyrosine na tryptophan katika molekuli ya protini. Licha ya unyeti wake wa juu, njia hii haitoi kila wakati matokeo ya kuaminika wakati wa kuamua maudhui ya protini kwenye mkojo. Sababu ya hii ni mwingiliano usio maalum wa reagent ya Folin na sehemu zisizo za protini za mkojo (mara nyingi amino asidi, asidi ya mkojo, wanga). Kutenganishwa kwa vipengele hivi na vingine vya mkojo kwa dayalisisi au udondoshaji wa protini huruhusu njia hii kutumika kwa mafanikio kubainisha kiasi cha protini kwenye mkojo. Dawa zingine - salicylates, chlorpromazine, tetracyclines zinaweza kuathiri njia hii na kupotosha matokeo ya utafiti.

Unyeti wa kutosha, uwezo wa kuzaliana vizuri, na urahisi wa kubainisha protini kwa kuunganisha rangi hufanya njia hizi ziwe za matumaini, lakini gharama ya juu ya vitendanishi huzuia matumizi yao mapana zaidi katika maabara. Hivi sasa, njia na pyrogallol nyekundu inazidi kuenea nchini Urusi.

Wakati wa kufanya utafiti wa kiwango cha proteinuria, unahitaji kukumbuka hilo mbinu mbalimbali ufafanuzi wa proteinuria una unyeti tofauti na maalum kwa protini nyingi za mkojo.

proteinuria = 0.4799 B + 0.5230 L;
proteinuria = 1.5484 B - 0.4825 S;
proteinuria = 0.2167 S + 0.7579 L;
proteinuria = 1.0748 P - 0.0986 B;
proteinuria = 1.0104 P - 0.0289 S;
proteinuria = 0.8959 P + 0.0845 L;

Wapi:
B- matokeo ya kipimo na Coomassie G-250;
L- matokeo ya kipimo na reagent ya Lowry;
P- matokeo ya kipimo na pyrogallol molybdate;
S- matokeo ya kipimo na asidi ya sulfosalicylic.

Kuzingatia mabadiliko ya kutamka katika kiwango cha proteinuria ndani nyakati tofauti siku, pamoja na utegemezi wa mkusanyiko wa protini kwenye mkojo kwenye diuresis, yaliyomo tofauti katika sehemu za kibinafsi za mkojo, kwa sasa, katika kesi ya ugonjwa wa figo, ni kawaida kutathmini ukali wa proteinuria kwa upotezaji wa kila siku wa protini kwenye mkojo. , yaani, kuamua kinachojulikana kila siku proteinuria. Inaonyeshwa kwa g / siku.

Ikiwa haiwezekani kukusanya mkojo wa kila siku, inashauriwa kuamua viwango vya protini na creatinine katika sehemu moja ya mkojo. Kwa kuwa kiwango cha uondoaji wa creatinine ni sawa siku nzima na haiathiriwi na mabadiliko katika kiwango cha pato la mkojo, uwiano wa mkusanyiko wa protini kwa mkusanyiko wa creatinine ni mara kwa mara. Mtazamo huu inahusiana vizuri na uondoaji wa protini kila siku na, kwa hivyo, inaweza kutumika kutathmini ukali wa proteinuria. Kwa kawaida, uwiano wa protini/kretini unapaswa kuwa chini ya 0.2. Protini na creatinine hupimwa kwa g/l. Faida muhimu ya njia ya kutathmini ukali wa proteinuria kwa kutumia uwiano wa protini-creatinine ni uondoaji kamili wa makosa yanayohusiana na kutowezekana au kutokamilika kwa mkusanyiko wa mkojo wa saa 24.

Fasihi:

• O. V. Novoselova, M. B. Pyatigorskaya, Yu. E. Mikhailov, "Mambo ya kliniki ya kutambua na kutathmini proteinuria", Kitabu cha mkuu wa maabara ya kliniki, No. 1, Januari 2007.
• A. V. Kozlov, "Proteinuria: mbinu za kugundua," hotuba, St. Petersburg, SPbMAPO, 2000.
• V. L. Emanuel, “Uchunguzi wa kimaabara wa magonjwa ya figo. Ugonjwa wa mkojo,” - Saraka ya mkuu wa maabara ya kliniki, No. 12, Desemba 2006.
• KATIKA NA. Pupkova, L.M. Prasolova - Uamuzi wa protini katika mkojo na maji ya cerebrospinal. Koltsovo, 2007
• Mwongozo wa Mbinu za Maabara ya Kliniki. Mh. E. A. Kost. Moscow, "Dawa", 1975