Uamuzi wa kiasi cha protini katika mkojo kwa kutumia analyzers. Uamuzi wa ubora wa protini kwenye mkojo

Uamuzi wa ubora na kiasi wa protini katika mkojo ni muhimu kwa kliniki.

Vipimo vya ubora wa kuamua protini kwenye mkojo
Zaidi ya athari 100 zimependekezwa kwa uamuzi wa ubora wa protini kwenye mkojo. Wengi wao hutegemea mvua ya protini kwa njia ya kimwili (inapokanzwa) au kemikali. Uwepo wa protini unathibitishwa na kuonekana kwa turbidity.

Sampuli za kavu za rangi pia ni za kupendeza.

Vipimo muhimu tu vya mazoezi ndivyo vitaelezewa hapa chini.

Jaribu na asidi ya sulfosalicylic. Kwa mililita kadhaa ya mkojo ongeza matone 2-4 ya suluhisho la 20% la asidi ya sulfosalicylic. Ikiwa majibu ni chanya, tope huonekana. Matokeo yake yameteuliwa na masharti: opalescence, chanya dhaifu, chanya au majibu chanya. Kipimo cha asidi ya sulfosalicylic ni moja ya vipimo nyeti zaidi vya kugundua protini kwenye mkojo. Inatambua hata ongezeko ndogo la pathological katika protini katika mkojo. Shukrani kwa mbinu yake rahisi, mtihani huu umepata matumizi makubwa.

Jaribu na aseptol. Aseptol ni mbadala ya asidi ya sulfosalicylic. Inaweza kutayarishwa kutoka kwa nyenzo zinazopatikana katika maabara yoyote (phenol na asidi ya sulfuriki). Suluhisho la 20% la Aseptol hutumiwa kama kitendanishi. Mtihani unafanywa kama ifuatavyo: katika tube ya mtihani iliyo na 2-3 ml ya mkojo, ongeza 0.5-1 ml ya suluhisho la aseptol chini. Ikiwa pete nyeupe ya protini iliyoganda inaonekana kwenye kiolesura kati ya vimiminika viwili, sampuli ni chanya.

Mtihani wa Heller. Chini ya mililita chache za mkojo huongeza 1-2 ml ya asidi ya nitriki 30% (mvuto maalum 1.20). Ikiwa pete nyeupe inaonekana kwenye mpaka wa vimiminika vyote viwili, sampuli ni chanya. Mmenyuko huwa chanya ikiwa maudhui ya protini ni zaidi ya 3.3 mg%. Wakati mwingine pete nyeupe hupatikana mbele ya kiasi kikubwa cha urate. Tofauti na pete ya protini, pete ya urate haionekani kwenye mpaka kati ya vinywaji vyote viwili, lakini juu kidogo. Larionova anapendekeza kutumia mmumunyo wa 1% wa asidi ya nitriki katika mmumunyo uliojaa wa chumvi ya meza kama kitendanishi badala ya 30% ya asidi ya nitriki; hii husababisha akiba kubwa katika asidi ya nitriki.

Jaribu na sulfidi ya chuma ya potasiamu na asidi asetiki. Mmenyuko huu hufanya iwezekanavyo kutofautisha protini za serum kutoka kwa nucleoalbumins.

Kiasi sawa cha mkojo hutiwa ndani ya mirija miwili ya majaribio. Matone machache ya suluhisho la 30% ya asidi ya asetiki huongezwa kwa mmoja wao. Ikiwa matokeo ni mawingu ikilinganishwa na tube ya kudhibiti, mkojo una nucleoalbumin. Ikiwa tope haionekani, yaliyomo kwenye mirija yote miwili ya mtihani huchanganywa na kugawanywa tena katika sehemu mbili. Matone machache (ziada inaweza kugeuza mtihani mzuri kuwa hasi) ya suluhisho la 10% la chumvi ya damu ya njano (sulfidi ya chuma ya potasiamu) huongezwa kwenye mojawapo ya zilizopo mbili za mtihani. Katika uwepo wa protini za whey, turbidity hupatikana.

Katika kesi ya mkojo uliojilimbikizia ulio na kiasi kikubwa cha asidi ya mkojo na urati, mtihani na sulfidi ya feri ya potasiamu na asidi ya asetiki inapaswa kufanywa baada ya dilution ya awali (mara 2-3) ya mkojo na maji. Vinginevyo, mawingu yanaweza kutokea kwa sababu ya asidi ya uric iliyokaa.

Hii ni muhimu hasa wakati wa kuchunguza mkojo wa watoto wachanga, ambao una mengi ya asidi ya uric na urate.

Kati ya vipimo vingine vya ubora wa protini kwenye mkojo, kulingana na uwekaji wa protini, zifuatazo zimetumika: mtihani wa kuchemsha, Esbach, Purdy, Roberts, Almen, Balloni, Buro, Claudius, Corso, Dome, Goodmann-Suzanne, Jollet, Exton, Kamlet, vipimo vya Kobuladze , Liliendahl-Petersen, Polacci, Pons, Spiegler, Tanre, Thiele, Brown, Tsushiya, nk.

Wakati wa kuzalisha sampuli za ubora wa protini katika mkojo kulingana na mvua ya protini, sheria zifuatazo za jumla lazima zizingatiwe, ukiukwaji wa ambayo husababisha makosa makubwa katika utafiti.

1. Mkojo unaopimwa lazima uwe na tindikali. Kwa mmenyuko wa alkali, mkojo hutiwa asidi kidogo na asidi ya asetiki. Kutoa sampuli na mkojo wa alkali katika hali ambapo asidi inatumiwa kama kitendanishi kunaweza kusababisha kutoweka kwa asidi na matokeo hasi katika majibu mazuri. Hii ni kweli hasa kwa mtihani wa asidi ya sulfosalicylic, kwani asidi huongezwa kwa kiasi kidogo sana na inaweza kupunguzwa kwa urahisi.

2. Mkojo unaopimwa uwe wazi.

3. Sampuli za kuamua protini kwenye mkojo zinapaswa kufanywa katika mirija miwili ya majaribio, ambayo moja hutumika kama udhibiti. Bila bomba la kudhibiti, unaweza usione tope kidogo wakati wa athari.

4. Kiasi cha asidi iliyoongezwa wakati wa kupima haipaswi kuwa kubwa sana. Kiasi kikubwa cha asidi kinaweza kusababisha uundaji wa acidalbumin mumunyifu na kugeuza sampuli nzuri kuwa hasi.

Kutokana na mbinu zao rahisi, sampuli za kavu za colorimetric zinastahili tahadhari kubwa. Vipimo hivi vinatumia athari ambayo protini ina kwenye rangi ya kiashiria kwenye suluhisho la bafa (kinachojulikana kama hitilafu ya protini ya viashiria). Kipande cha karatasi cha chujio kilicholowekwa kwenye bafa ya sitrati yenye tindikali na samawati ya bromophenol kama kiashirio hutumbukizwa kwa muda mfupi kwenye mkojo. Jaribio ni chanya ikiwa rangi ni bluu-kijani. Kwa kulinganisha ukubwa wa rangi na viwango vya karatasi za rangi, hitimisho la majaribio na la kiasi linaweza kutolewa. Karatasi ya kiashiria inauzwa katika reams na viwango vya rangi vinavyolingana, sawa na karatasi ya kiashiria cha ulimwengu wote.

Njia za kuamua kiasi cha protini kwenye mkojo
Mbinu nyingi zimependekezwa kwa uamuzi wa kiasi cha protini kwenye mkojo. Mbinu sahihi za kiasi cha kuamua protini katika nyenzo za kibaolojia hazijatumiwa sana katika kuamua protini katika mkojo kutokana na mbinu ngumu na za kazi kubwa. Mbinu za volumetric, hasa njia ya Esbach, zimeenea. Wao ni rahisi sana, lakini, kwa bahati mbaya, sio sahihi sana. Njia za kikundi cha Brandberg-Stolnikov pia ni rahisi kwa kliniki, kutoa matokeo sahihi zaidi kuliko njia za volumetric na mbinu rahisi. Ikiwa una photometer au nephelometer, njia za nephelometric pia zinafaa.

Mbinu ya Esbach. Ilipendekezwa na daktari wa Paris Esbach mwaka wa 1874. Mkojo na reagent hutiwa kwenye tube maalum ya mtihani (Esbach albuminometer). Bomba la mtihani limefungwa na kizuizi cha mpira, kilichochochewa kabisa (bila kutetemeka!) Na kushoto katika nafasi ya wima hadi siku inayofuata. Mgawanyiko ambao safu ya sediment ya protini hufikia huhesabiwa. Nambari iliyopatikana inaonyesha maudhui ya protini. Ni muhimu sana kwa njia ya Esbach kwamba mkojo ni tindikali. Mkojo wa alkali unaweza kupunguza viambajengo vya tindikali vya kitendanishi na kuzuia kunyesha kwa protini.

Faida za njia: ni rahisi na rahisi katika mazoezi.

Hasara: njia sio sahihi, matokeo hupatikana kwa masaa 24 - 48.

Njia ya Brandberg-Stolnikov. Inategemea mtihani wa ubora wa Geller. Jaribio la Heller linaweza kutumika kwa uamuzi wa kiasi, kwani hutoa matokeo mazuri wakati maudhui ya protini ni zaidi ya 3.3 mg%. Huu ndio mkusanyiko wa juu wa protini chini ambayo sampuli inakuwa hasi.

Marekebisho ya Ehrlich na Althausen. Wanasayansi wa Soviet S. L. Erlikh na A. Ya. Althauzen walirekebisha njia ya Brandberg-Stolnikov, wakionyesha uwezekano wa kurahisisha utafiti na kuokoa muda katika uzalishaji wake.

Urahisishaji wa kwanza unahusiana na wakati wa kuonekana kwa pete. Wakati halisi wa kuonekana kwake imedhamiriwa, bila lazima kuambatana na dakika ya 2 na 3.

Urahisishaji wa pili hufanya iwezekanavyo kuamua ni aina gani ya dilution inapaswa kufanywa. Waandishi walithibitisha kuwa dilution inayohitajika inaweza kuwa takriban kuamua na kuonekana kwa pete inayosababisha. Wanatofautisha thread-kama, pana
na pete ya kompakt.

Ya njia za nephelometric, inastahili kuzingatiwa Njia ya Kingsberry na Clark. Mimina 2.5 ml ya mkojo uliochujwa kwenye silinda ndogo iliyohitimu na ujaze na suluhisho la maji la 3% la asidi ya sulfosalicylic hadi 10 ml. Koroga vizuri na baada ya dakika 5 piga picha kwenye cuvette ya sentimita 1 ukitumia kichujio cha manjano, ukitumia maji kama kioevu cha fidia. Kwa kipima picha cha Pulfrich, upotevu uliopatikana, unaozidishwa na 2.5, unatoa kiasi cha protini katika %o. Katika kesi wakati index ya kutoweka iko juu ya 1.0, mkojo hupunguzwa kwanza mara 2, mara 4 au hata zaidi.

Ili kuwa na wazo wazi la kiasi cha protini zilizotolewa kwenye mkojo, ni muhimu kuamua sio tu mkusanyiko wao katika sehemu tofauti ya mkojo, lakini pia kiasi chao cha kila siku. Ili kufanya hivyo, kukusanya mkojo wa mgonjwa kwa saa 24, kupima kiasi chake katika mililita na kuamua ukolezi wa protini katika sehemu ya mkojo wa kila siku katika g%. Kiasi cha protini kilichotolewa katika mkojo katika masaa 24 imedhamiriwa kulingana na kiasi cha kila siku cha mkojo katika gramu.

Umuhimu wa kliniki wa protini kwenye mkojo

Mkojo wa binadamu kwa kawaida huwa na kiasi kidogo cha protini, ambacho hakiwezi kuamuliwa na vipimo vya kawaida vya ubora wa protini ya mkojo. Utoaji wa kiasi kikubwa cha protini, ambapo vipimo vya kawaida vya ubora wa protini kwenye mkojo huwa chanya, ni jambo lisilo la kawaida linaloitwa proteinuria. Proteinuria ni ya kisaikolojia tu kwa mtoto mchanga, katika siku 4-10 za kwanza baada ya kuzaliwa. Jina la kawaida la albuminuria sio sahihi, kwa sababu sio tu albamu hutolewa kwenye mkojo, lakini pia aina nyingine za protini (globulins, nk).

Proteinuria iligunduliwa kama dalili ya utambuzi mnamo 1770 na Cotugno.

Proteinuria ya figo inayofanya kazi zaidi kwa watoto ni kama ifuatavyo.

1. Proteinuria ya kisaikolojia ya mtoto mchanga. Hutokea kwa watoto wengi wachanga na haina maana mbaya. Inafafanuliwa na chujio dhaifu cha figo, uharibifu wakati wa kuzaliwa, au kupoteza maji katika siku za kwanza za maisha. Proteinuria ya kisaikolojia hupotea siku ya 4-10 baada ya kuzaliwa (baadaye kwa watoto wa mapema). Kiasi cha protini ni kidogo. Hii ni nucleoalbumin.

Albuminuria ya watoto wachanga ambayo inaendelea kwa muda mrefu inaweza kuwa dalili ya lues ya kuzaliwa.

2. Albuminuria ya kiharusi. Husababishwa na kuzidi kizingiti cha kuwashwa kwa kawaida kwa chujio cha figo na mitambo, mafuta, kemikali, akili na hasira zingine - upotezaji wa maji kwa watoto wachanga (proteinuria ya upungufu wa maji mwilini), kuoga baridi, chakula chenye protini nyingi (alimentary proteinuria). palpation ya figo (palpatory albuminuria), kazi nyingi za kimwili, hofu, nk.

Albuminuria ya kiharusi hutokea kwa urahisi zaidi kwa watoto katika umri mdogo kuliko watoto wakubwa na watu wazima, kwani figo za mtoto mchanga na mtoto mdogo huwashwa kwa urahisi zaidi. Ukosefu wa maji mwilini albuminuria (matatizo ya kulisha, udhaifu wa maji, toxicosis, kuhara, kutapika) mara nyingi huzingatiwa kwa watoto wachanga.

Albuminuria ya kiharusi ni mbaya. Wanatoweka mara moja baada ya sababu zinazosababisha kuondolewa. Wakati mwingine sediment ina leukocytes moja, casts na erythrocytes. Protini mara nyingi ni nucleoalbumin.

3. Proteinuria ya Orthostatic. Hali hii ni ya kawaida kwa watoto wa shule ya mapema na umri wa shule. Inatokea kutokana na usumbufu wa vasomotor katika utoaji wa damu kwa figo. Kawaida ya albuminuria ya orthostatic (kwa hiyo jina lake) ni kwamba inaonekana tu wakati mtoto amesimama, wakati mgongo uko katika nafasi ya lordotic. Wakati amelala hupotea. Nucleoalbumin inatolewa. Katika hali ya shaka, unaweza kuamua jaribio la orthostatic, ambalo lina yafuatayo: jioni, saa moja kabla ya kulala, mtoto huondoa kibofu cha kibofu; Asubuhi, anapotoka kitandani, hutoa mkojo tena. Mkojo huu hauna protini. Kisha mtoto huwekwa kwa magoti yake kwa dakika 15-30 na fimbo nyuma ya mgongo wake, kati ya viwiko vilivyoinama vya mikono yote miwili. Msimamo wa lordotic huundwa, ambayo inaongoza kwa kutolewa kwa protini, bila mabadiliko katika sediment.

Kwa albuminuria ya orthostatic, 8-10 g ya protini inaweza kutolewa kwa siku.

Proteinuria ya figo ya kikaboni ina umuhimu muhimu zaidi wa kliniki kati ya proteinuria yote. Wao husababishwa na magonjwa ya figo ya kikaboni (nephritis, nephrosis, nephrosclerosis). Proteinuria ni mojawapo ya dalili muhimu na zinazojulikana zaidi za ugonjwa wa figo wa kikaboni.

1. Katika glomerulonephritis ya papo hapo na ya muda mrefu, protiniuria hutokea mara kwa mara. Kiasi cha protini ni wastani, na hakuna usawa kati ya kiwango cha proteinuria na ukali wa ugonjwa huo. Kinyume chake, nephritis ya muda mrefu na kali zaidi mara nyingi hutokea kwa protini kidogo kuliko nephritis ya papo hapo. Baada ya nephritis ya papo hapo, wakati mwingine kwa muda mrefu (miaka), kiasi kidogo cha protini hugunduliwa kwenye mkojo, ambao hauna umuhimu wa pathological ("residual albuminuria"). Hatupaswi kusahau kwamba "nephritis bila proteinuria" inaweza pia kutokea. Wakati mwingine protini hupatikana katika sehemu moja ya mkojo, lakini si kwa mwingine. Uwiano wa albumin na globulini katika nephritis ya papo hapo ni ya chini, na katika nephritis ya muda mrefu ni ya juu.

2. Kwa nephrosclerosis, kiasi cha protini katika mkojo ni kidogo sana; aina za ugonjwa bila protini katika mkojo hupatikana mara nyingi.

3. Katika magonjwa yote ya figo, nephrosis hutokea kwa protiniuria kali zaidi.

4. Katika hali ya kuambukiza na ya sumu, kinachojulikana kama febrile na sumu ya proteinuria hutokea. Hizi ni nephrosis ya papo hapo, ambayo kiasi cha protini ni ndogo. Kundi hili pia linajumuisha proteinuria wakati wa hali ya degedege (degedege), hyperfunction ya tezi ya tezi, homa ya manjano, intussusception, enterocolitis, nzito, anemia kali, nk Albuminuria hizi ni benign na hupita haraka (albuminuria ya muda mfupi).

5. Wakati damu inapungua kwenye figo, kinachojulikana kuwa albuminuria ya congestive hutokea, ambayo ni tabia ya wagonjwa wa moyo katika hatua ya decompensation. Pia hutokea kwa ascites na tumors ya tumbo.

Katika albuminuria yenye homa, yenye sumu na yenye msongamano, upenyezaji ulioongezeka wa kichujio cha figo hutamkwa haswa. Kwa mujibu wa waandishi wengine, wengi wa protini hizi hutokea bila uharibifu wa kikaboni kwa parenchyma ya figo.

Albuminuria ya nje ya matumbo kawaida husababishwa na uchafu wa protini (secretions, seli zilizooza), ambazo hutolewa na njia za mkojo zilizo na ugonjwa na sehemu za siri. Albuminuria ya nje ya urembo ni ya kawaida zaidi kwa sababu ya cystopyelitis (pyuria), mara chache kutokana na vulvovaginitis, mawe na uvimbe wa njia ya mkojo.

Kwa albuminuria ya extrarenal, idadi kubwa ya leukocytes na bakteria hupatikana kwenye sediment. Vipengele vya figo karibu hazipatikani. Kiasi cha protini ni kidogo. Mkojo uliochujwa au uliowekwa katikati kwa kawaida hauonekani kuwa na protini.

Kwa wale wanaopona kutoka kwa pyelitis, albuminuria hupotea baada ya bacteriuria na pyuria.

Inapaswa kusisitizwa kama jambo la tabia kwamba katika utoto wa mapema magonjwa ya figo ya kikaboni huonekana mara chache sana, kwa hivyo proteinuria ya kikaboni pia ni nadra. Kati ya hizi, kuna hasa homa na sumu. Tofauti na proteinuria ya kikaboni, albuminuria ya kiharusi ni ya kawaida sana kwa watoto katika umri mdogo.

Katika watoto wakubwa, proteinuria ya kikaboni mara nyingi hufanya kazi. Kwa ujumla, kwa umri, proteinuria ya kazi hutokea mara kwa mara, na proteinuria ya kikaboni mara nyingi zaidi.

Masomo ya electrophoretic ya protini katika mkojo

Waandishi kadhaa hutumia njia ya electrophoretic kusoma protini kwenye mkojo (uroproteins). Kutoka kwa electropherograms zilizopatikana ni wazi kwamba zina muundo wa ubora sawa na protini za plasma. Hii inaonyesha kwamba protini katika mkojo hutoka kwa protini za plasma.

Ukuaji wa patholojia nyingi za figo ni tofauti kwa kuwa wanaweza kuwa na kipindi kirefu cha siri (kilichofichwa). Kwa hivyo, uchambuzi kama huo kama ufafanuzi bila shaka ni muhimu zaidi kwa madaktari wa utaalam mwingi.

Kazi ya Nephron na proteinuria

Wakati wa ultrafiltration, idadi kubwa ya molekuli tofauti za protini na amino asidi huingia kwenye utungaji wa mkojo wa msingi. Hii haishangazi; kwa protini nyingi, saizi ya wastani inazidi kizingiti cha kupita kwenye utando. Na molekuli za amino asidi huchajiwa polar. Hii pia ina jukumu katika "uhifadhi" wao kwenye uso wa membrane. Hata hivyo, wakati wa kupitisha mkojo wa msingi kupitia tubules za nephron, karibu protini zote na amino asidi huingizwa tena (huingizwa tena) ndani ya damu. Kwa sababu hii, mkojo wa sekondari unaweza kuwa na si zaidi ya mia ya gramu ya protini.

Nambari za kawaida wakati wa kuamua protini katika mkojo kwa kutumia mbinu za kawaida haipaswi kuzidi gramu 0.033 kwa lita. Mtu mzima mwenye afya anaweza kutoa hadi gramu 0.15 kwa siku. Zaidi ya hayo, karibu 1-2% yao ni albamu. 90% iliyobaki inahesabiwa (kuna aina 30 hivi) na glycoproteins - protini kuu za membrane. Mwisho huonekana kwenye mkojo kutokana na shughuli za podocytes. Kwa sababu wakati seli yoyote inafanya kazi, uharibifu wa mara kwa mara wa membrane hauepukiki. Lakini uharibifu huu ni, kwanza, sio muhimu, na pili, haraka "huponya" shukrani kwa taratibu za mara kwa mara za kuzaliwa upya kwake. Pia ni pamoja na katika 90% hii ni mucoproteins - molekuli za protini zinazoingia kwenye lumen ya tubules wakati wa uendeshaji wa epithelium ya kitanzi cha Henle.

Kuna aina kadhaa za proteinuria. Wao ni msingi tu juu ya mtihani wa mkojo kwa protini ya kila siku.

• Proteinuria ya kawaida. Utoaji wa protini hauzidi gramu 0.15 zinazojulikana kwa siku.
• Proteinuria ya wastani. Imewekwa wakati kutokwa ni zaidi ya 0.15, lakini chini ya gramu 3.5 kwa siku.
• Proteinuria kubwa inamaanisha kuwa figo hutoa zaidi ya gramu 3.5 za molekuli za protini katika masaa 24.

Sababu za proteinuria na taratibu za maendeleo yake

Kulingana na taratibu za kimsingi za kuchujwa na kufyonzwa tena, kiasi cha ziada cha protini kinachotolewa kwenye mkojo kinaweza kutokana na uharibifu wa mirija, glomeruli, na njia ya mkojo.

• Uharibifu wa Glomerular. Inaongoza kwa kinachojulikana kama glomerular proteinuria. Katika hali ya kawaida, protini huhifadhiwa na membrane. Kiasi kidogo tu kinaweza kupita kupitia pores zake. Kwa hivyo, tubules hazijatolewa na mifumo maalum ya kunyonya tena kwa protini, ambayo kwa kweli haifiki hapo. Hapa tunazungumza juu ya albin. Ingawa huhifadhiwa na utando wa podocytes, sio zaidi ya 2% huingia kwenye mkojo wa msingi, kwa kuwa, kwa sababu ya malipo yao hasi, huhifadhiwa na membrane ya chini na haiingii kwenye cavity ya capsule ya nephron. Hata hivyo, wakati utando unaharibiwa, albumin hukimbilia kwenye cavity ya capsule na haipatikani tena kutoka kwenye tubules. Ndio sababu, na ugonjwa wa glomerular, kiwango kidogo cha proteinuria kinazingatiwa: mvuto maalum wa albin hairuhusu athari kali kwa viashiria ambavyo hutumiwa kuamua protini kwenye mkojo.
• Patholojia ya tubules. Hapa ultrafiltration si kuharibika. Kwa kuwa kufyonzwa tena kunateseka, kiwango kamili cha proteinuria kitakuwa muhimu kwa sababu ya ukweli kwamba muundo wa mkojo wa sekondari ni pamoja na idadi kubwa ya protini coarse. Lakini hata hapa ni muhimu kufanya uhifadhi kwamba viashiria nyeti zaidi vinahitajika ili kuamua. Kwa kuwa hatua ya wengi wao inalenga kuamua idadi ya chembe za protini zilizoshtakiwa. Ambayo kimsingi ni albamu na ambayo katika hali hizi haziongezeki sana, au huwa ndani ya mipaka ya kawaida kila wakati. Kwa hiyo, mtihani wa mkojo kwa protini jumla unaweza kutoa matokeo ya uongo kuhusu kiwango halisi cha proteinuria.

Uamuzi wa protini katika mkojo

Ni muhimu! Njia kuu ya kugundua proteinuria ni mtihani wa protini ya mkojo. Viashiria maalum vinatumika kwa nini? Kizingiti cha chini cha unyeti wa vijiti vingi vya mtihani ni miligramu 30 kwa lita.

Hata hivyo, hapa pia ni lazima ikumbukwe kwamba ukanda wa mtihani ni nyeti kwa mkusanyiko wa protini ndani ya mia ya millimeter kutoka kwa uso wake. Kwa hivyo, na mkojo uliopunguka sana, kamba itaonyesha matokeo mabaya, hata ikiwa proteinuria ni zaidi ya 50 au hata 70 mg.

Ili kuepuka "mapungufu" hayo ya njia za uchunguzi wa maabara, kupima mkojo ni bora kufanywa asubuhi, wakati ukolezi wake ni wa juu zaidi. Ikiwa uchambuzi wa jumla unaonyesha proteinuria zaidi ya 0.033 g / l, ili kuthibitisha, utafiti juu ya maudhui ya protini ya kila siku hufanyika.

Ni mojawapo ya ishara muhimu na za kudumu za magonjwa ya figo na njia ya mkojo. Uamuzi wa mkusanyiko wa protini katika mkojo ni kipengele cha lazima na muhimu cha kupima mkojo. Utambuzi na tathmini ya kiasi cha proteinuria ni muhimu sio tu katika utambuzi wa magonjwa mengi ya msingi na ya sekondari ya figo; tathmini ya mabadiliko katika ukali wa proteinuria kwa muda hubeba habari juu ya mwendo wa mchakato wa patholojia na ufanisi wa matibabu. Ugunduzi wa protini kwenye mkojo, hata kwa kiasi kidogo, unapaswa kuongeza alama nyekundu kwa uwezekano wa ugonjwa wa figo au njia ya mkojo na kuhitaji kupimwa mara kwa mara. Ya kumbuka hasa ni kutokuwa na maana ya kuchunguza mkojo na, hasa, kuamua protini ya mkojo bila kufuata sheria zote za mkusanyiko wake.

Njia zote za kuamua protini kwenye mkojo zinaweza kugawanywa katika:

• Ubora wa juu,
• Nusu kiasi,
• Kiasi.

Mbinu za ubora

Wote vipimo vya ubora wa protini kwenye mkojo kwa msingi wa uwezo wa protini kujitenga chini ya ushawishi wa mambo anuwai ya mwili na kemikali. Ikiwa protini iko kwenye sampuli ya mkojo inayojaribiwa, aidha uchafu au mashapo yanayotiririka huonekana.

Masharti ya kuamua protini kwenye mkojo kulingana na mmenyuko wa kuganda:

1. Mkojo unapaswa kuwa tindikali. Mkojo wa alkali hutiwa asidi na matone machache (2 - 3) ya asidi asetiki (5 - 10%).
2. Mkojo unapaswa kuwa wazi. Unyevu huondolewa kupitia kichujio cha karatasi. Ikiwa uchafu haupotee, ongeza talc au magnesia ya kuteketezwa (kuhusu kijiko 1 kwa 100 ml ya mkojo), tikisa na chujio.
3. Mtihani wa ubora unapaswa kufanywa katika zilizopo mbili za mtihani, moja yao ni ya kudhibiti.
4. Unapaswa kutafuta ukungu kwenye mandharinyuma nyeusi kwenye mwanga unaopitishwa.

Njia za ubora wa kuamua protini kwenye mkojo ni pamoja na:

• mtihani wa kuchemsha, na wengine.

Kama tafiti nyingi zinavyoonyesha, hakuna hata moja kati ya idadi kubwa ya mbinu zinazojulikana za kuamua ubora wa protini kwenye mkojo inaruhusu kupata matokeo ya kuaminika na ya kuzaliana. Pamoja na hayo, katika DDL nyingi nchini Urusi njia hizi hutumiwa sana kama uchunguzi - kwenye mkojo na athari chanya ya ubora, uamuzi wa upimaji wa protini unafanywa baadaye. Ya athari za ubora, mtihani wa Heller na mtihani wa asidi ya sulfosalicylic hutumiwa mara nyingi, lakini mtihani na asidi ya sulfosalicylic kwa ujumla huchukuliwa kuwa yanafaa zaidi kwa kutambua protiniuria ya pathological. Mtihani wa kuchemsha kwa sasa hautumiwi kwa sababu ya nguvu ya kazi na muda.

Njia za nusu-kiasi

KWA njia za nusu kiasi kuhusiana:

• uamuzi wa protini katika mkojo kwa kutumia vipande vya uchunguzi wa uchunguzi.

Njia ya Brandberg-Roberts-Stolnikov inategemea mtihani wa pete ya Heller, kwa hivyo kwa njia hii makosa sawa yanazingatiwa na mtihani wa Heller.

Hivi sasa, vipande vya uchunguzi vinazidi kutumiwa kuamua protini katika mkojo. Kwa uamuzi wa nusu kiasi wa protini kwenye mkojo kwenye mstari, rangi ya bromophenol ya bluu katika bafa ya sitrati hutumiwa mara nyingi kama kiashirio. Maudhui ya protini katika mkojo huhukumiwa na ukubwa wa rangi ya bluu-kijani ambayo inakua baada ya kuwasiliana na eneo la majibu na mkojo. Matokeo yake ni tathmini ya kuibua au kutumia uchambuzi wa mkojo. Licha ya umaarufu mkubwa na faida za wazi za mbinu za kemia kavu (unyenyekevu, kasi ya uchambuzi), njia hizi za uchambuzi wa mkojo kwa ujumla na uamuzi wa protini hasa sio bila vikwazo vikubwa. Mmoja wao, na kusababisha kupotosha kwa taarifa za uchunguzi, ni unyeti mkubwa wa kiashiria cha bluu cha bromophenol kwa albumin ikilinganishwa na protini nyingine. Katika suala hili, vipande vya mtihani hubadilishwa hasa ili kugundua protini ya glomerular iliyochaguliwa, wakati karibu protini zote za mkojo ni albumin. Pamoja na maendeleo ya mabadiliko na mpito wa proteinuria ya glomerular iliyochaguliwa hadi isiyo ya kuchagua (kuonekana kwa globulins kwenye mkojo), matokeo ya uamuzi wa protini yanageuka kuwa ya kupunguzwa ikilinganishwa na maadili ya kweli. Ukweli huu haufanyi iwezekanavyo kutumia njia hii kwa kuamua protini katika mkojo ili kutathmini hali ya figo (kichujio cha glomerular) kwa muda. Kwa proteinuria ya tubular, matokeo ya uamuzi wa protini pia hupunguzwa. Upimaji wa protini kwa kutumia vipande vya majaribio si kiashirio cha kutegemewa cha viwango vya chini vya proteinuria (vipimo vingi vinavyopatikana kwa sasa havina uwezo wa kutambua viwango vya protini kwenye mkojo chini ya 0.15 g/L). Matokeo mabaya ya uamuzi wa protini kwenye vipande haujumuishi uwepo wa globulini, hemoglobin, uromucoid, protini ya Bence Jones na paraproteini nyingine kwenye mkojo.

Vipande vya kamasi vilivyo na maudhui ya juu ya glycoproteins (kwa mfano, wakati wa michakato ya uchochezi katika njia ya mkojo, pyuria, bacteriuria) inaweza kukaa kwenye eneo la kiashiria cha ukanda na kusababisha matokeo chanya ya uwongo. Matokeo chanya ya uwongo yanaweza pia kuwa kwa sababu ya viwango vya juu vya urea. Taa mbaya na maono ya rangi yaliyoharibika yanaweza kusababisha matokeo yasiyofaa.

Katika suala hili, matumizi ya vipande vya uchunguzi inapaswa kuwa mdogo kwa taratibu za uchunguzi, na matokeo yaliyopatikana kwa msaada wao yanapaswa kuchukuliwa kuwa dalili tu.

Mbinu za kiasi

Sahihi uamuzi wa kiasi cha protini katika mkojo katika baadhi ya matukio inageuka kuwa kazi ngumu. Ugumu wa kuisuluhisha imedhamiriwa na idadi ya mambo yafuatayo:

• maudhui ya chini ya protini katika mkojo wa mtu mwenye afya, mara nyingi kwenye kizingiti cha unyeti wa njia zinazojulikana zaidi;
• uwepo katika mkojo wa misombo mingi ambayo inaweza kuingilia kati na mwendo wa athari za kemikali;
• kushuka kwa thamani kubwa katika maudhui na muundo wa protini za mkojo katika magonjwa mbalimbali, na kufanya kuwa vigumu kuchagua nyenzo za kutosha za calibration.

Katika maabara ya kliniki, mbinu zinazoitwa "kawaida" za kuamua protini katika mkojo hutumiwa hasa, lakini si mara zote hutoa matokeo ya kuridhisha.

Kwa mtazamo wa mchambuzi wa maabara, njia iliyokusudiwa kuamua kiasi cha protini kwenye mkojo lazima ikidhi mahitaji yafuatayo:

• kuwa na uhusiano wa mstari kati ya unyonyaji wa changamano iliyoundwa wakati wa mmenyuko wa kemikali na maudhui ya protini katika sampuli juu ya viwango mbalimbali, ambayo itaepuka shughuli za ziada wakati wa kuandaa sampuli kwa ajili ya utafiti;
• inapaswa kuwa rahisi, bila kuhitaji sifa za juu za mtendaji, na kufanywa na idadi ndogo ya shughuli;
• kuwa na unyeti mkubwa na uaminifu wa uchambuzi wakati wa kutumia kiasi kidogo cha nyenzo za mtihani;
• kuwa sugu kwa mambo anuwai (kubadilika kwa muundo wa sampuli, uwepo wa dawa, nk);
• kuwa na gharama inayokubalika;
• kubadilika kwa urahisi kwa vichanganuzi otomatiki;
• matokeo ya uamuzi haipaswi kutegemea muundo wa protini wa sampuli ya mkojo unaojaribiwa.

Hakuna njia yoyote inayojulikana kwa sasa ya kuamua kiasi cha protini kwenye mkojo inayoweza kudai kuwa "kiwango cha dhahabu".

Mbinu za kiasi za kuamua protini kwenye mkojo zinaweza kugawanywa katika turbidimetric na colorimetric.

Mbinu za turbidimetric

Mbinu za turbidimetric ni pamoja na:

• uamuzi wa protini na asidi ya sulfosalicylic (SSA),
• uamuzi wa protini na asidi ya trichloroacetic (TCA),
• uamuzi wa protini na kloridi ya benzethonium.

Mbinu za turbidimetric zinatokana na kupungua kwa umumunyifu wa protini za mkojo kutokana na kuundwa kwa kusimamishwa kwa chembe zilizosimamishwa chini ya ushawishi wa mawakala wa mvua. Maudhui ya protini katika sampuli ya jaribio yanatathminiwa ama kwa ukubwa wa mtawanyiko wa mwanga, unaoamuliwa na idadi ya chembe zinazotawanya mwanga (njia ya nephelometric ya uchanganuzi), au kwa kupunguzwa kwa mtiririko wa mwanga kwa kusimamishwa (njia ya turbidimetric ya uchambuzi). )

Kiasi cha kutawanya kwa mwanga katika njia za unyeshaji wa kugundua protini kwenye mkojo hutegemea mambo mengi: kiwango cha mchanganyiko wa vitendanishi, joto la mchanganyiko wa mmenyuko, thamani ya pH ya kati, uwepo wa misombo ya kigeni, na njia za photometric. Kuzingatia kwa uangalifu hali ya majibu itasababisha kuundwa kwa kusimamishwa imara na ukubwa wa chembe mara kwa mara na matokeo ya kuzaliana kiasi.

Dawa zingine huathiri matokeo ya mbinu za turbidimetric za kuamua protini katika mkojo, na kusababisha kile kinachoitwa "chanya cha uwongo" au "matokeo mabaya ya uwongo". Hizi ni pamoja na baadhi ya antibiotics (benzylpenicillin, cloxacillin, nk), vitu vyenye iodini ya radiocontrast, dawa za sulfonamide.

Mbinu za turbidimetric ni ngumu kusanifisha na mara nyingi husababisha matokeo yenye makosa, lakini licha ya hii, kwa sasa zinatumika sana katika maabara kutokana na gharama ndogo na upatikanaji wa vitendanishi. Njia inayotumiwa sana nchini Urusi kwa uamuzi wa protini ni asidi ya sulfosalicylic.

Mbinu za rangi

Nyeti zaidi na sahihi ni mbinu za rangi za kuamua jumla ya protini ya mkojo, kulingana na athari maalum ya rangi ya protini.

Hizi ni pamoja na:

1. mmenyuko wa biuret,
2. Mbinu ya chini,
3. njia kulingana na uwezo wa dyes mbalimbali kuunda tata na protini:
   • Ponceau S,
   • Coomassie Brilliant Blue
   • pyrogallol nyekundu.

Kwa mtazamo wa mtendaji, katika kazi ya kila siku ya maabara na mtiririko mkubwa wa utafiti, njia ya biuret haifai kwa sababu ya idadi kubwa ya shughuli. Wakati huo huo, njia hiyo ina sifa ya kuegemea juu ya uchambuzi, inaruhusu uamuzi wa protini katika viwango vingi na kugundua albin, globulins na paraproteins kwa unyeti kulinganishwa, kama matokeo ya ambayo njia ya biuret inazingatiwa kama dawa. rejea na inapendekezwa kwa kulinganisha mbinu zingine za uchanganuzi za kugundua protini kwenye mkojo. Njia ya biuret ya kuamua protini katika mkojo inapendekezwa kufanywa katika maabara zinazohudumia idara za nephrology, na hutumiwa katika hali ambapo matokeo ya uamuzi kwa kutumia mbinu nyingine ni ya shaka, na pia kuamua kiasi cha kupoteza protini kila siku kwa wagonjwa wa nephrology.

Mbinu ya Lowry, ambayo ni nyeti zaidi kuliko njia ya biuret, inachanganya mmenyuko wa biureti na mmenyuko wa Folini kwa amino asidi tyrosine na tryptophan katika molekuli ya protini. Licha ya unyeti wake wa juu, njia hii haitoi kila wakati matokeo ya kuaminika wakati wa kuamua maudhui ya protini kwenye mkojo. Sababu ya hii ni mwingiliano usio maalum wa reagent ya Folin na sehemu zisizo za protini za mkojo (mara nyingi amino asidi, asidi ya mkojo, wanga). Kutenganishwa kwa vipengele hivi na vingine vya mkojo kwa dayalisisi au udondoshaji wa protini huruhusu njia hii kutumika kwa mafanikio kubainisha kiasi cha protini kwenye mkojo. Dawa zingine - salicylates, chlorpromazine, tetracyclines zinaweza kuathiri njia hii na kupotosha matokeo ya utafiti.

Unyeti wa kutosha, uwezo wa kuzaliana vizuri, na urahisi wa kubainisha protini kwa kuunganisha rangi hufanya njia hizi ziwe za matumaini, lakini gharama ya juu ya vitendanishi huzuia matumizi yao mapana zaidi katika maabara. Hivi sasa, njia na pyrogallol nyekundu inazidi kuenea nchini Urusi.

Wakati wa kufanya utafiti wa kiwango cha proteinuria, unahitaji kukumbuka kuwa njia tofauti za kuamua proteinuria zina unyeti tofauti na maalum kwa protini nyingi za mkojo.

proteinuria = 0.4799 B + 0.5230 L;
proteinuria = 1.5484 B - 0.4825 S;
proteinuria = 0.2167 S + 0.7579 L;
proteinuria = 1.0748 P - 0.0986 B;
proteinuria = 1.0104 P - 0.0289 S;
proteinuria = 0.8959 P + 0.0845 L;

Wapi:
B- matokeo ya kipimo na Coomassie G-250;
L- matokeo ya kipimo na reagent ya Lowry;
P- matokeo ya kipimo na pyrogallol molybdate;
S- matokeo ya kipimo na asidi ya sulfosalicylic.

Kwa kuzingatia mabadiliko yaliyotamkwa katika kiwango cha proteinuria kwa nyakati tofauti za siku, na vile vile utegemezi wa mkusanyiko wa protini kwenye mkojo kwenye diuresis, yaliyomo tofauti katika sehemu za mkojo, kwa sasa, katika kesi ya ugonjwa wa figo. , ni desturi ya kutathmini ukali wa proteinuria kwa kupoteza kila siku kwa protini katika mkojo, yaani, kuamua kinachojulikana kila siku proteinuria. Inaonyeshwa kwa g / siku.

Ikiwa haiwezekani kukusanya mkojo wa kila siku, inashauriwa kuamua viwango vya protini na creatinine katika sehemu moja ya mkojo. Kwa kuwa kiwango cha uondoaji wa creatinine ni sawa siku nzima na haiathiriwi na mabadiliko katika kiwango cha pato la mkojo, uwiano wa mkusanyiko wa protini kwa mkusanyiko wa creatinine ni mara kwa mara. Uwiano huu unahusiana vyema na uondoaji wa kila siku wa protini na, kwa hiyo, unaweza kutumika kutathmini ukali wa proteinuria. Kwa kawaida, uwiano wa protini/kretini unapaswa kuwa chini ya 0.2. Protini na creatinine hupimwa kwa g/l. Faida muhimu ya njia ya kutathmini ukali wa proteinuria kwa kutumia uwiano wa protini-creatinine ni uondoaji kamili wa makosa yanayohusiana na kutowezekana au kutokamilika kwa mkusanyiko wa mkojo wa saa 24.

Fasihi:

• O. V. Novoselova, M. B. Pyatigorskaya, Yu. E. Mikhailov, "Mambo ya kliniki ya kutambua na kutathmini proteinuria", Kitabu cha mkuu wa maabara ya kliniki, No. 1, Januari 2007.
• A. V. Kozlov, "Proteinuria: mbinu za kugundua," hotuba, St. Petersburg, SPbMAPO, 2000.
• V. L. Emanuel, “Uchunguzi wa kimaabara wa magonjwa ya figo. Ugonjwa wa mkojo,” - Saraka ya mkuu wa maabara ya kliniki, No. 12, Desemba 2006.
• KATIKA NA. Pupkova, L.M. Prasolova - Uamuzi wa protini katika mkojo na maji ya cerebrospinal. Koltsovo, 2007
• Mwongozo wa Mbinu za Maabara ya Kliniki. Mh. E. A. Kost. Moscow, "Dawa", 1975

Magonjwa mengi hutokea bila maonyesho ya kliniki yaliyotamkwa, hivyo uamuzi wa protini katika mkojo kwa madhumuni ya kutambua kwa wakati na matibabu ya hali ya patholojia ni hatua muhimu kwa dawa ya vitendo.

Protini katika mkojo inaweza kuamua kwa njia za ubora na kiasi.

Mbinu za ubora

Hivi sasa kuna takriban athari 100 za ubora zinazojulikana kwa protini. Yanahusisha kunyesha kwa protini kwa hatua ya kimwili au ya kemikali. Kwa mmenyuko mzuri, mawingu hutokea.

Mitihani yenye habari zaidi ni:

• Pamoja na asidi ya sulfosalicylic. Inachukuliwa kuwa nyeti zaidi na kwa msaada wake inawezekana kuamua hata kiasi kidogo cha miili ya protini katika mkojo. Maelezo ya matokeo ya uwepo wa protini huteuliwa na neno "opalescence", na kwa kiwango kikubwa - "chanya dhaifu", "chanya" na upotezaji mkubwa wa protini kwenye mkojo - "majibu chanya" .
• Na mbadala ya asidi - aseptol. Suluhisho la dutu linaongezwa kwenye mkojo, na wakati pete inapofanya kwenye mpaka wa ufumbuzi, sampuli inasemekana kuwa nzuri.
• Geller. Imetolewa kwa kutumia suluhisho la asidi ya nitriki. Matokeo ya utaratibu yanatafsiriwa sawa na ile ya Aseptol. Wakati mwingine pete inaweza kuwepo wakati urate iko kwenye kioevu cha mtihani.
• Na asidi ya asetiki na kuongeza ya dioksidi ya sulfuri ya potasiamu. Ikiwa mkusanyiko wa mkojo ni wa juu wakati wa kufanya mtihani kama huo, hupunguzwa, vinginevyo matokeo chanya ya uwongo yanaweza kusababisha, kwani majibu yatakuwa kwa urati na asidi ya mkojo.

Kufanya mtihani usiofaa mara nyingi kunaweza kutoa matokeo yasiyo sahihi kwa watoto wachanga, kwani mkojo wao huundwa na maudhui ya juu ya asidi ya uric.

Sheria za msingi wakati wa kufanya vipimo ni kama ifuatavyo: inahitajika kwamba mkojo unaojaribiwa ni wazi, una mazingira ya asidi kidogo (kwa hili, kiasi kidogo cha asidi ya asetiki wakati mwingine huongezwa ndani yake), lazima kuwe na zilizopo mbili za mtihani. ufuatiliaji.

kiasi

Wakati mtihani wa mkojo unafanywa, jumla ya protini pia imedhamiriwa kwa kutumia mbinu za upimaji. Kuna wachache wao, lakini wanaotumiwa zaidi ni yafuatayo:

• Mbinu ya Esbach. Imetumika tangu karne ya 19. Kwa kufanya hivyo, mkojo na reagent hutiwa kwenye tube fulani ya mtihani. Kisha mchanganyiko hutikiswa kidogo na kushoto kufunikwa kwa masaa 24-48. Mvua unaosababishwa huhesabiwa kwa mgawanyiko kwenye tube ya mtihani. Hitimisho sahihi linaweza kutolewa tu na mkojo wa tindikali. Mbinu hii ni rahisi sana, lakini haina usahihi wa juu na inachukua muda.
• Njia ya Brandberg-Stolnikov. Kulingana na mtihani wa Heller, ambayo inakuwezesha kupata matokeo na mkusanyiko wa protini wa zaidi ya 3.3 mg%. Baadaye njia hii ilirekebishwa na kurahisishwa.
• Njia za Nephelometric za kuamua kiasi cha protini hutumiwa sana.

Ili kuelewa kikamilifu kiasi cha protini, ni bora kutumia mtihani wa mkojo kwa protini ya kila siku.

• Kwa matokeo sahihi, sehemu ya asubuhi ya kwanza inamwagika, mkusanyiko huanza na sehemu ya pili kwenye chombo kimoja, ambacho kinapendekezwa kuwekwa kwenye jokofu.

Sehemu ya mwisho inakusanywa asubuhi. Baada ya hayo, unahitaji kupima kiasi, kisha uchanganya vizuri, na kumwaga sehemu ya si zaidi ya 50 ml kwenye jar. Chombo hiki kinapaswa kuwasilishwa kwa maabara. Fomu maalum inahitaji uonyeshe matokeo ya jumla ya kiasi cha mkojo wa kila siku, pamoja na urefu na uzito wa mgonjwa.

Kutumia vipande vya mtihani

Mtihani wa protini katika mkojo hufanya kazi kwa kanuni ya viashiria. Vipande maalum vinaweza kubadilisha rangi kulingana na mkusanyiko wa protini. Ni rahisi kuamua mabadiliko yanayotokea kwa nyakati tofauti, na hutumiwa nyumbani na katika taasisi yoyote ya matibabu na kinga.

Vipande vya mkojo wa mtihani hutumiwa wakati ni muhimu kuamua mapema na kufuatilia matokeo ya matibabu ya pathologies ya genitourinary. Mbinu hii ya uchunguzi ni nyeti na humenyuka kwa albumin katika mkusanyiko wake kutoka 0.1 g/l, na inakuwezesha kuamua mabadiliko ya ubora na nusu ya kiasi katika maudhui ya protini katika mkojo.

Kulingana na matokeo ya uchunguzi huu, unaweza kufuatilia ufanisi wa tiba, kufanya marekebisho yake, na kuagiza chakula muhimu.